红鳍笛鲷血清免疫球蛋白的部分理化特性及红鳍笛鲷对弧菌疫苗的免疫应答

摘要

采用亲和层析法，分离纯化红鳍笛鲷血清免疫球蛋白(IgM)。用羊IgG免疫红鳍笛鲷产生特异性抗体，免疫扩散法测得其血清效价为1：8，将偶联羊IgG的琼脂糖装柱纯化红鳍笛鲷血清中的特异性抗体。经SDS-PAGE电泳，图谱显示二条主区带，即重链和轻链。重、轻链分子量分别为80kD和29kD；图谱中除二条主区带外，无杂蛋白带，说明纯化的血清IgM的纯度很高。免疫扩散法，发现红鳍笛鲷血清IgM只与兔抗红鳍笛鲷血清IgM出现沉淀反应；而人IgM只与羊抗人IgM血清发生沉淀反应，这些表明红鳍笛鲷血清IgM与人IgM之间无免疫同源性。 收集正常生活下的非免疫红鳍笛鲷的胆汁和皮肤粘液，比较它们与分离纯化的红鳍笛鲷血清IgM之间的同源性，发现胆汁和皮肽粘液都与兔抗红鳍笛鲷血清IgM的抗血清有沉淀反应。结果表明：胆汁和皮肤粘液中存在的IgM的某些理化性质同血清中的IgM相似，由此推断，红鳍笛鲷的胆汁和皮肤粘液中IgM的来源可能与血清中IgM具有一定的免疫同源性。 采用单向放射免疫扩散法，测出红鳍笛鲷未免向．清中TgM的含量达达13.5mg／ml，当用羊IgG免疫红鳍笛鲷时，血清抗体效价达到25.8mg／mL。 用溶藻弧菌的灭活全菌苗作为免疫原，分别以1×lO8<'8>cfu／mL，l×10<'9>cfu／mL和9×10<'9>cfu／mL三个浓度免疫接种红鳍笛鲷，通过测定受免鱼血清中凝集抗体效价和鱼体攻毒试验，探讨了红鳍笛鲷对灭活的溶藻弧菌菌苗的免疫应答状况。结果表明为：①免疫后从第7d车开始，3组免疫鱼血清中都检测到抗体。注射疫苗1×10<'8>cfu／mL和1×10<'9>cfu／mL组都在第28d抗体效价达到最高，分别为1：98.4和1：135.3；而注射疫苗9×10<'9>cfu／mL组血清抗体效价升高很快，第2周抗体效价就达到最高的水平1：384；直到第6周3组鱼血清抗体效价仍然保持在较高水平。②在免疫后50天，用浓度为1.0×lO<'9>cfu／mL的溶藻弧菌悬液进行攻毒，测得的免疫保护率分别为56％、69％、80％。

目录

文摘

英文文摘

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第一章红鳍笛鲷血清免疫球蛋白的分离纯化及其部分理化特性分析

第二章红鳍笛鲷对溶藻弧菌灭活疫苗的免疫应答

小结

参考文献

致谢