橙色莫桑比克罗非鱼（♀）和荷那龙罗非鱼（♂）的杂交试验

摘要

为了培育新的罗非鱼杂交种，本试验采用罗非鱼种间杂交的方法，以橙色莫桑比克罗非鱼Oreochromis mossambicus(♀)和荷那龙罗非鱼Oreochromis hornorum(♂)为亲本，繁殖得到了杂交F1(莫荷鱼)。利用蛋白质电泳技术研究了两亲本的同工酶组织特异性，并运用AFLP分子标记技术分析了两亲本种群内、种群间的遗传多样性，同时对两亲本及其杂种F1进行了低温致死、耗氧率以及耐盐试验，并比较了莫荷鱼与尼奥鱼(尼罗罗非鱼♀×奥利亚罗非鱼♂)的生长差异。为罗非鱼新杂交种的获得提供基础资料。结果如下：1、橙色莫桑比克罗非鱼和荷那龙罗非鱼的同工酶电泳分析 　对两亲本罗非鱼的5种组织(肝脏、心脏、肌肉、脑和肾脏)中的EST、SOD和LDH三种同工酶进行了初步分析，结果表明三种同工酶均具有明显的组织特异性。EST在两种罗非鱼的肝脏中表达最强，且带型也最复杂。两种罗非鱼具有相似的SOD和LDH酶谱，SOD在肌肉中的酶带条数最多且多数酶带的表达量较高。LDH在脑中丰富表达。同时同工酶的分析结果显示橙色莫桑比克罗非鱼相对荷那龙罗非鱼具有多种基因型，可能含有较多可供选择的等位基因，可用于良种选育。2、橙色莫桑比克罗非鱼和荷那龙罗非鱼群体的遗传多样性研究 　运用AFLP分子标记检测了橙色莫桑比克罗非鱼和荷那龙罗非鱼的遗传多样性。用筛选出的3对选扩引物组合(E-AGG/M-CTT、E/AGG/M-CAT和E-ACG/M-CTT)在橙色莫桑比克罗非鱼种群中分别检出32、19和23条带，在荷那龙罗非鱼种群中分别检出35、22和25条带。橙色莫桑比克罗非鱼种群内遗传相似系数为0.765，荷那龙罗非鱼为0.821，说明两种罗非鱼种群内遗传多态性均较高，但相对而言橙色莫桑比克罗非鱼种群内遗传多样性比荷那龙罗非鱼更丰富些，具有更大的选育空间。两种罗非鱼的种间遗传距离为0.306，表明两种罗非鱼具有一定的遗传距离，杂交产生的子代可能具有一定的杂种优势。3、橙色莫桑比克罗非鱼和荷那龙罗非鱼及杂交F1的主要生物学、生理学测定3.1 性成熟年龄及怀卵量 橙色莫桑比克罗非鱼和荷那龙罗非鱼最小繁殖年龄均为6个月，属于多次产卵，其性成熟最小体长分别为6.60cm和8.64cm，最小体重分别为14.077g和37.544g。橙色莫桑比克罗非鱼和荷那龙罗非鱼的绝对繁殖力(怀卵量，粒)分别为620～97l和716～983，相对殖力分别为31.233±7.190和17.860±3.1913.2耐盐性 设置6个盐度梯度：0、15、25、30、35和40，检测两亲本罗非鱼的耐盐性。结果表明：橙色莫桑比克罗非鱼和荷那龙罗非鱼均属于耐盐性较强的鱼类。在几种耐盐指标中，橙色莫桑比克罗非鱼和荷那龙罗非鱼的96小时半致死盐度分别为22.29和21.56；在除盐度为40外的其它各盐度中，橙色莫桑比克罗非鱼的50％死亡时间和平均死亡时间均高于荷那龙罗非鱼，但差异不显著(p>0.05)。在盐度驯化试验中，两亲本罗非鱼均能耐受较高盐度咸水并维持较低死亡率。 3.3耗氧率 用呼吸室法测定橙色莫桑比克罗非鱼、荷那龙罗非鱼及莫荷鱼不同温度下的耗氧率，结果表明：(1)水温为16～32℃时，两亲本及莫荷鱼的耗氧率范围分别是，橙色莫桑比克罗非鱼(体重18.98～102.53g)0.06～0.43mg/gh，荷那龙罗非鱼(体重10.40～116.28g)0.07～0.61m/g.h，莫荷鱼(体重2.24～133.82g)0.06～0.65m/g.h。(2)两亲本及莫荷鱼的耗氧率存在昼夜变化规律，耗氧率随着温度的升高而增加，同时与试验鱼体重呈负相关。(3)水温24℃时，两亲本及莫荷鱼的溶氧临界窒息点分别是，橙色莫桑比克罗非鱼为0.31～0.45mg／L，荷那龙罗非鱼为0.33～0.55mg／L，莫荷鱼为0.38～0.43mg／L。 3.4低温耐受能力 通过人工加冰降温的方法比较了两亲本及莫荷鱼的低温耐受能力，结果表明：橙色莫桑比克罗非鱼、荷那龙罗非鱼及莫荷鱼的低温死亡温度范围分别是9.9～8.0℃、15.1～9.5℃和11.4～7.5℃；半致死低温分别为：9.2℃、10.1℃和8.57℃，说明两亲本及杂交F1对低温的耐受能力均较差。 4、莫荷鱼与尼奥鱼养殖性能比较 比较莫荷鱼与四个不同品系尼罗罗非鱼(♀)与奥利亚罗非鱼(♂)的杂交F1(尼奥I、尼奥Ⅱ、尼奥Ⅲ、尼奥Ⅳ)的养殖性能，试验结果表明：(1)绝对增重率(mg/d)：莫荷鱼(1.054)>尼奥Ⅱ(0.710)>尼奥Ⅲ(0.666)>尼奥Ⅳ(0.597)>尼奥I(0.579)(p<0.05)；(2)雄性率(％)：莫荷鱼(100)>尼奥III(99.3)>尼奥I(88.9)>尼奥II(86.6)>尼奥Ⅳ(85.9)(p<0.05)；(3)肥满度(K)：莫荷鱼(4.183)>尼奥Ⅳ(4.072)>尼奥Ⅲ(3.960)>尼奥Ⅱ(3.906)>尼奥I(3.763)(p<0.01)。养殖生长试验表明橙色莫桑比克罗非鱼♀×荷那龙罗非鱼♂的杂交F1养殖性能较好，具有推广价值。 本研究从蛋白质水平和DNA分子水平均发现，相对而言橙色莫桑比克罗非鱼种群的遗传多样性更丰富，AFLP分析结果表明两亲本具有较远的遗传距离，推测杂交Fl应该具有一定的杂种优势。同时杂交生产试验表明杂种F1莫荷鱼养殖性能好，生产实践和理论一致。从理论和生产试验证明该罗非鱼杂交组合应用前景良好。

目录

文摘

英文文摘

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第一章引言

第二章橙色莫桑比克罗非鱼和荷那龙罗非鱼的同工酶研究

第三章橙色莫桑比克罗非鱼和荷那龙罗非鱼的AFLP分析

第四章橙色莫桑比克罗非鱼、荷那龙罗非鱼的及杂交F1生物学、生理学研究

总结

亟待解决的问题

参考文献

致谢

附录

作者简历及硕士期间撰写的论文