中国人静止型α-地中海贫血基因单核苷酸变异、单体型及诊断方法研究

摘要

背景和目的:中国南方是α-地中海贫血的高发地区,静止型α-地中海贫血的-α<'3.7>、-α<'4.2>和-α<'4.2HbQ>基因的序列特征仍未明确,现有针对基因缺失的检测方法较难适应大规模人群筛查及临床诊断的需要.该研究的目的是通过多样该测序获得与中国人静止型α-地中海贫血-α<'3.7>、-α<'4.2>和-α<'4.2HbQ>基因缺失断裂点相关的单核昔酸变异及单体型,为阐明其分子机制提供有价值的信息,并在此基础上设计新的静止型α-地中海贫血快速检测技术.设计和方法: 针对-α<'3.7>、-α<'4.2>和-α<'4.2HbQ>基因以及相应正常人α-珠蛋白基因同源序列(X2、X1盒和Z2、Z1盒),设计PCR扩增体系,并将PCR产物直接测序以获取其DNA序列.对所测得的8个-α<'3.7>基因、10个-α<'4.2>基因(其中1例为以色列人样品)、3例-α<'4.2HbQ>基因和4例正常同源基因的序列进行同源性比较,寻找与-α<'3.7>、-α<'4.2>和-α<'4.2HbQ>基因缺失断裂点相关的单核苷酸变异及单体型,并在此基础上建立针对这些特征序列的PCR-DHPLC检测技术.结论: 该研究获得了中国人-α<'3.7>和-α<'4.2>基因及其正常人同源片段的DNA序列,为阐明中国人静止型α-地中海贫血的-α<'4.2>缺失的分子机制提供了有价值的信息.利用-α<'4.2>基因特有的单核苷酸变异和单体型,建立了可以快速筛查αα/αα、-α<'4.2>/αα、--<'SEA>/-α<'4.2>和-α<'4.2HbQ>/αα等四种基因型的PCR-DHPLC分子诊断技术.

目录

英文缩略词表

引言

实验材料

实验方法

实验结果

分析与讨论

小结

参考文献

综述

参考文献

附图

致谢

附录