Smad3及相关因子在人骨关节炎发生中作用机理的研究

摘要

为了研究Smad3基因在人OA发生中的作用,我们利用PCR-SSCP银染技术检测了32例膝OA患者Smad3基因所有外显子的基因突变情况,在1例患者的Smad3基因的第4外显子上发现了1个单碱基突变(656A→T),同时引起了该处密码子(197AAC→ATC)编码氨基酸的改变(天冬酰胺N→异亮氨酸I),该突变位置处于SMAD3的连接区(linker region).结果表明Smad3基因可能是OA的易感基因,其突变可能直接导致了OA的发生或者加速了OA的进程,提示Smad3基因在人OA的发生中可能起着重要的作用.同时,为了探讨金属蛋白酶-2(MMP-2)和--9(MMP-9)在人OA中的作用,我们利用明胶酶谱分析技术检测了其在OA患者血清中的表达水平,结果发现病例组血清中MMP-2和MMP-9的表达水平均明显高于对照组(P<0.05),同时我们还发现在携带有Smad3基因突变的患者血清中的两者的表达水平均分别高于各自在对照组和病例组的平均水平.

目录

Abstract in English

第一章人骨关节炎的Smad3基因突变分析

1.1前言

1.2材料与方法

1.2.1标本来源

1.2.2基因组DNA制备

1.2.3 PCR

1.2.4 SSCP分析

1.2.5银染

1.2.6 PCR产物序列分析

1.3结果

1.3.1样品基因组DNA的获得

1.3.2 PCR产物片段的获得

1.3.3 SSCP分析

1.3.4 Smad3基因突变分析

1.4讨论

1.5参考文献

第二章人骨关节炎血清中MMP-2与MMP-9的明胶酶谱分析

2.1前言

2.2材料与方法

2.2.1研究对象

2.2.2血清的获得

2.2.3血清蛋白浓度定量

2.2.4明胶酶谱分析

2.2.5图象分析

2.2.6统计学处理

2.3结果

2.3.1血清中MMP-2和MMP-9明胶酶谱分析

2.3.2血清中MMP-2和MMP-9的表达水平的相对定量

2.3.3血清中的MMP-2和MMP-9表达水平的统计学分析

2.4讨论

2.5参考文献

综述

英文缩写词对照表

致谢

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