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水通道蛋白1在大鼠肺泡Ⅱ型细胞上的表达及ARDS状态下其表达变化的研究

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第一部分:ARDS大鼠模型的建立及大鼠肺泡Ⅱ型细胞的分离、纯化、鉴定

材料和方法

结 果

讨 论

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摘要

我们的研究目的是在成功建立大鼠ARDS模型并分离纯化肺泡Ⅱ型细胞的基础上确定大鼠肺泡Ⅱ型细胞膜上是否存在AQP1,并进一步观察大鼠在油酸所致ARDS状态下Ⅱ型细胞AQP1表达的变化,为ARDS发病机制的研究提供新的实现和理论依据.方法:该实验分油酸组和对照组,实验的第一部分通过静脉注射油酸建立ARDS大鼠动物模型,按照Dobbs等提供的方法并适当改进分离大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞,用IgG免疫粘附的方法纯化分离的细胞,细胞鉴定采取鞣酸染色和电镜方法,电镜下观察ARDS大鼠肺泡Ⅱ型细胞的超微结构改变.第二部分通过免疫组化、免疫电镜、Western Bloting方法鉴定肺泡Ⅱ型细胞上是否存在AQP1,运用免疫组化、Western Bloting和图像分析技术,对正常大鼠和ARDS大鼠Ⅱ型细胞AQP1的表达水平进行对比观察,分析变化,这部分是该课题的重点和关键.

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