HBV转录后调节序列在非细胞毒机制中的作用及其异质性的生物学意义

摘要

对乙型肝炎病毒转录后调节序列(HPRE)在非细胞毒机制中的作用及其异质性的生物学意义进行研究,探讨IFN-γ、TNF-α和IFN-α对乙型肝炎病毒转录后调节的影响.采用PCR反应产物直接测序法,对31例中国南方HBV感染者血清HBV DNA的HPRE片段扩增后测序,与Genbank中来源于欧美白种人群HBV感染者HBV DNA序列进行比较,并结合临床资料进行分析.应用定点突变技术,体外构建含有HPRE位点变异的重组质粒载体,观察HPRE位点变异对HPRE功能以及细胞因子抗HBV机制的影响.经测序证实,成功构建了含有HPRE变异位点的重组质粒载体.与野生株比较,1504nt突变株的CAT活性明显升高,差异有显著性;1508nt突变株则无明显变化.在IFN-γ或/和TNF-α作用下,三种突变株的CAT活性均明显下降,在IFN-α作用下,1504nt突变株和1504+1508nt突变株的CAT表达活性明显降低,差异有显著性(P<0.01);而1508nt突变株的CAT表达活性无明显变化(P>0.05).提示HPRE1504nt位点变异可能影响HPRE功能,而1508nt位点变异可能逃逸了IFN-α对HPRE的抑制作用.

目录

摘要

Abstract

前言

实验设计路线图

第一部分IFN-γ和TNF-α对乙型肝炎病毒转录后调节机制的影响研究

第二部分HBV转录后调节序列中与α干扰素应答有关位点的初步鉴定与分析

第三部分HBV转录后调节序列差异位点的生物学意义初探

全文总结

参考文献

论文撰写情况

致谢