STI571诱导K562细胞耐药机制的研究

摘要

研究背景和目的:慢性髓系白血病(CML)是一种起源于多能造血干细胞的恶性克隆增殖性疾病，其恶性克隆标志是费城染色体(Ph)及Bcr/Abl融合基因。后者编码产生的Bcr/Abl融合蛋白，即P210Bcr-Abl蛋白，具有异常增高的蛋白酪氨酸激酶(PTK)活性，被认为是导致CML发病的根本原因。 STI571(又名伊马替尼，商品名格列卫)，是一种小分子信号传导抑制剂，它能竞争性地与P210Bcr-Abl蛋白上的ATP结合位点结合，通过抑制癌蛋白的PTK活性而导致肿瘤细胞增殖受抑、凋亡增加。该药用于CML的治疗以来，取得了显著的临床疗效。但随着它的广泛应用，人们发现部分患者对STI571存在原发与继发耐药。如此高度靶向性治疗药物如同其它抗肿瘤化疗药物一样，很快出现了耐药现象，这引起了人们的关注，并成为CML研究的又一热点。 目前，STI571耐药机制仍不清楚，主要的观点包括：①MDR-1基因的高表达；②Bcr/Abl基因扩增及其表达增加；③Abl激酶区基因的点突变；④a1-酸性糖蛋白作用；⑤其它蛋白酪氨酸激酶(如LYN激酶)或蛋白酪氨酸磷酸酶(如TC-PTP)的作用等等。综合分析发现，STI571耐药机制十分复杂，可能涉及多个基因或蛋白以及多个传导通路的异常。 因此，为了能够深入探讨STI571耐药机制，选用Bcr/Abl融合基因阳性的K562细胞，试图在体外建立STI571耐药CML细胞系，并以此为平台进行耐药机制进一步研究。 结论: 1.体外成功建立STI571耐药的K562细胞系，耐药浓度为0.5umol/L，耐药倍数为(2.04±0.16)倍。 2.K562-R的耐药可能主要与Bcr/Abl融合基因扩增有关。 3.通过对基因芯片的比较分析，我们发现多个细胞信号/传递蛋白类基因和代谢/蛋白翻译合成类基因的表达出现了明显差异，它们可能参与STI571耐药过程。

目录

文摘

英文文摘

前言

第一章K562耐药细胞系的诱导及其生物学性能分析

一、材料

二、方法

三、结果

四、讨论

附图

第二章K562耐药细胞耐药机制的初步分析

一、材料

二、方法

三、结果

四、讨论

附图

全文小结

参考文献

英文缩略词表

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