ABSTRACT
第一章绪论
引言
1、转基因作物的潜在风险性分析
2、转病毒基因植物的风险性分析
3、植物病毒RNA重组的研究概况
3.1、雀麦花叶病毒组病毒RNA重组
3.2、植物病毒RNA重组的机理
3.3、转基因植物中病毒RNA与转基因间重组
3.4、RNA重组对RNA病毒的种群多态性和致病性的影响
4、本研究的技术路线与目的
第二章豇豆褪绿斑驳病毒(CCMV)RNA3突变体的构建和侵染株系的建立
引言
1、材料与方法
1.1、克隆构建
1.2、病毒克隆的体外转录
1.3、病毒克隆转录产物的接种
1.4、病毒RNA的提取
1.5、病毒RNA的RT-PCR
1.6、CCMV突变体侵染株系的检验
2、结果与分析
2.1、豇豆褪绿斑驳病毒突变体的侵染症状
2.2、从TP7、TP8和AG1侵染的植株中提取的病毒RNA
2.3、豇豆褪绿斑驳病毒突变体的RT-PCR产物。
2.4、豇豆褪绿斑驳病毒突变体及其侵染株系的确认
3、讨论
第三章豇豆褪绿斑驳病毒(CCMV)突变体混合侵染的建立和混合侵染植株中CCMV-RNA3的群体多态性初步分析
引言
1、材料与方法
1.1、豇豆褪绿斑驳病毒突变体的混合侵染的建立：
1.2、混合侵染植株的病毒RNA的提取
1.3、混合侵染植株的病毒RNA的RT-PCR
1.4、混合侵染植株的病毒RNA3的RT-PCR产物的酶切分析
2、结果与分析
2.1、豇豆褪绿斑驳病毒突变体混合侵染的症状
2.2、豇豆褪绿斑驳病毒突变体混合侵染后的病毒多态性
3、讨论
第四章豇豆褪绿斑驳病毒突变体混合侵染植株的CCMV-RNA3的cDNA克隆及其群体数量结构分析
引言
1、材料与方法
1.1、混合侵染植株中病毒RNA的提取及RT-PCR
1.2、混合侵染植株的病毒RT-PCR产物的克隆
1.3、病毒克隆的繁殖和质粒的快速提取
1.4、病毒克隆的酶切分析
2、结果与分析
2.1、病毒克隆的酶切图谱
2.2、豇豆褪绿斑驳病毒突变体混合侵染植株中CCMV-RNA3的群体数量结构
3、讨论
第五章豇豆褪绿斑驳病毒CCMV-RNA3突变体重组子的序列测定及RNA重组率分析
1、材料与方法
1.1、待测序的病毒克隆质粒的提取
1.2、病毒克隆的序列测定
1.3、病毒克隆的序列测定中所使用的CCMV-RNA3引物
1.4、CCMV-RNA3的RNA重组率的确定
2、结果与分析
2.1、TP7+TP8混合侵染植株中所发现的5个无酶切标记的CCMV-RNA3克隆的序列测定结果
2.2、TP7+AG1混合侵染植株中所发现的9个无酶切标记的序列和2个双酶切标记RNA3克隆序列测定结果
2.3、TP8+AG1混合侵染植株中所发现的9个无酶切标记的病毒和8个双酶切标记RNA3克隆序列测定结果
2.4、豇豆褪绿斑驳病毒突变体混合侵染植株中的CCMV-RNA3群体结构。
2.5、豇豆褪绿斑驳病毒突变体混合侵染植株的CCMV-RNA3重组率
2.6、豇豆褪绿斑驳病毒不同突变体混合侵染植株的CCMV-RNA3重组率及突变体点突变率的方差分析
3、讨论
第六章结论与讨论
1、豇豆褪绿斑驳病毒(CCMV)RNA3突变体的建立与生物学比较
2、豇豆褪绿斑驳病毒(CCMV)RNA3不同突变体混合侵染及其多态性研究
3、豇豆褪绿斑驳病毒混合侵染植株中CCMV-RNA3的重组率及突变体突变率
4、本研究对揭示RNA病毒侵染、变异、自然选择和进化规律的启示作用
参考文献
致 谢
附录1：英文缩略词
附录2：野生型CCMV-RNA3 CDNA全长DNA序列
