发根农杆菌对烟草的转化及发根培育和烟碱合成条件的优化

摘要

本试验研究了发根农杆菌Ri质粒转化烟草的各种影响因素，确定了最佳的转化条件，建立了烟草发根培养系统；对发根与非转化根的形态结构、生长动态进行了研究，并在悬浮条件下，进行了不同理化因子对烟草发根生长和烟碱合成调控的研究。 本研究通过发根农杆菌工程菌Ar1334(含有野生型pRi1855质粒和pIG121HM双元载体质粒，编码NPTⅡ基因和GUS基因)转化烟草沙姆逊，获得了具有卡那霉素抗性烟草发状根，该发状根具有典型的发状根特性(多根毛、多分支、在无激素培养基上快速生长)，通过根尖压片分析，烟草发状根不具备典型的根冠；发状根向培养液中释放烟碱，释放量最多时占总烟碱量的96.3％；在无激素的培养基上获得了再生植株。

目录

文摘

英文文摘

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第一章绪论

1.1植物次生代谢产物及其利用

1.2 Ri质粒及发根特性

1.3利用发根培养生产次生代谢物质

1.4烟草发根的研究进展

第二章发根农杆菌对烟草转化系统的建立和优化

2.1引言

2.2材料与方法

2.3结果和分析

第三章烟草发状根培养及烟碱合成条件的优化

3.1引言

3.2材料与方法

3.3结果和分析

第四章结果与讨论

4.1烟草发状根的比较研究

4.2烟草发状根的分子检测

4.3发根农杆菌对烟草转化因素影响的研究

4.4各种理化因子对烟草发状根生长和烟碱合成的影响

4.5需要进一步开展的工作

4.6结论

附录

参考文献

致谢