产几丁质酶芽孢杆菌的筛选及抗真菌应用研究

摘要

本研究主要对动物肠道的芽孢杆菌资源进行了发掘，并进行了产几丁质酶芽孢杆菌的筛选、发酵及抗真菌方面的研究，主要研究结果如下：从动物肠道、昆虫、海沙等样品中分离到210株芽孢杆菌，并进行了纯化、保藏和76项表型特征的测定，且在此基础上进行了数值分类。研究结果表明：供试芽孢杆菌分布广泛，具有较大的表型多样性，并获得了一批具有特定抗性和应用价值的菌株，扩充了现有的芽孢杆菌菌种资源库。 从210株芽孢杆菌中筛选到67株几丁质酶产生菌，以扩展青霉(Penicilliumexpansum)、梨黑斑病菌(Alternariaalternata)、棉花黄萎病菌(VerticilliumdahliaeKleb.)991为病原指示菌，进一步筛选到12株几丁质酶活高且对其中一种及以上抑菌效果较好的菌株，其中TZl98几丁质酶活最高，达149U/ml且对P.expansum和V.dahliaeKleb.991具有强烈的抑制作用，结合表型特征和16SrDNA基因序列分析，确定为蜡样芽孢杆菌(Bacilluscereus)。 进行了蜡样芽孢杆菌TZ198与多粘类芽孢杆菌T16混合发酵抗真菌的初步研究，获得了良好的效果。研究结果表明两者在添加1％(W/V)茯苓粉的产酶发酵基础培养基中，以1∶1的接种比例混合发酵时，其抗菌效果比单菌发酵有显著的提高，对三种指示菌的抗菌活性比TZ198单独发酵分别提高了2.6倍、6.4倍和2.5倍，比T16单独发酵分别提高了54.1％、48.6％和20.0％，且对P.expansum和V.dahliaeKleb.991的抑制效果明显好于A.alternata；正交试验优化结果表明混合发酵对三种病原菌的抑制效果基本一致，均以1∶1的接种比例，添加1％(W/V)茯苓粉时的抑菌效果最佳，且茯苓粉的添加量对抑菌活性影响显著(P＜0.05)。

目录

文摘

英文文摘

独创性声明及关于论文使用授权的说明

第一章文献综述

第二章芽孢杆菌的分离纯化、保藏和表型测定

第三章产几丁质酶芽孢杆菌的筛选及抗真菌研究

第四章芽孢杆菌混合发酵抗真菌初步研究

第五章全文工作总结和展望

参考文献

致谢

附录

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