益气养阴固冲方及其拆方对无排卵性功血气阴两虚证大鼠AQP1、TSP-1影响的实验研究

摘要

目的:
　　本课题旨在通过动物实验,分析研究益气养阴固冲方及其拆方对无排卵性功血气阴两虚证模型大鼠体重、子宫指数、血液流变学、子宫内膜病理形态学、子宫内膜水通道蛋白1(AQP1)及血小板反应素-1(TSP-1)的影响,探讨该方的组方原理及其对无排卵性功血气阴两虚证大鼠子宫内膜血管形成的作用,并为优化组方奠定基础,以期为该方的进一步研究和临床应用提供实验依据。
　　方法:
　　选取SPF级健康雌性SD大鼠70只,随机分出1组行假手术作为空白对照组,每日正常给食,灌胃生理盐水。余大鼠行双侧卵巢去势手术,伤口愈合后使之每日饥饿、疲劳游泳,同步灌胃补佳乐溶液,连续14天,并于第11日起每日灌胃氢化可的松注射液,连续4日。补佳乐灌胃第15日起将余大鼠随机分为模型对照组、宫血宁组、益气组、固冲组、养阴组、全方组,分别灌胃相应药物,空白对照组及模型对照组每日灌胃生理盐水,连续5日。最后一次灌胃40分钟后处死大鼠,摘取子宫并称量,检测大鼠血液流变学指标、子宫内膜病理形态、AQP1及TSP-1。
　　结果:
　　1.造模后大鼠与空白对照组大鼠比较出现气虚及阴虚表现,用药后大鼠症状明显改善,但组间无显著差异。
　　2.模型对照组大鼠与空白对照组比较,体重显著降低,子宫指数显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);各用药组与模型对照组比较,体重显著升高,子宫指数显著降低,差异有统计学意义(P<0.05),各用药组间比较无统计学差异(P>0.05)。
　　3.各模型组大鼠子宫内膜较空白对照组增厚,腺上皮细胞排列杂乱不整齐,腺体增多,腺腔增大。用药后则显著改善,在全方组和益气组表现更明显。
　　4.各模型组大鼠全血粘度低、中、高切值、红细胞聚集指数、红细胞压积较空白对照组均明显升高(P<0.05),各用药组与模型对照组比较有统计学差异(P<0.05),各用药组间比较无统计学差异(P>0.05)。
　　5.各模型组大鼠子宫内膜AQP1的OD值及其阳性染色的MVD较空白对照组降低, TSP-1的OD值及其阳性染色的MVD较空白对照组升高,此二者的差异均有统计学意义(P<0.05);AQP1与TSP-1呈负相关,差异有统计学意义(r=﹣0.963,P<0.01)。用药后上述指标均显著改善(P<0.05),且二者在益气组及全方组的改变较余用药组有显著性差异(P<0.05),而益气组与全方组比较无明显差异(P>0.05),余用药组间比较无明显差异(P>0.05)。
　　结论:
　　1.益气养阴固冲方除改善无排卵性功血气阴两虚证大鼠的体重、子宫指数等一般状况外,还可改善子宫内膜形态,其中益气组和全方组药作用显著,可补气摄血止崩,通过增强子宫内膜自我修复功能以止血。
　　2.益气养阴固冲方通过益气健脾养阴、固冲止血作用调节血液流动性和粘滞性,改善血液“浓、粘、聚”状态,缓解内膜出血及阴虚症状。
　　3.益气养阴固冲方可提高无排卵性功血气阴两虚证大鼠子宫内膜中AQP1蛋白表达,增加其阳性染色的MVD;降低TSP-1蛋白表达,减少其阳性染色的MVD。该方通过促进子宫内膜微血管的形成及子宫内膜自我修复功能,以达到对无排卵性功血气阴两虚证的治疗作用。

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缩 略 词 表

前言

一 立题依据

二 研究进展

1 现代医学对无排卵性功能失调性子宫出血的认识

2 祖国医学对无排卵性功能失调性子宫出血（崩漏）的认识

3 AQP1、TSP-1与血管形成之研究

4 本课题研究的意义和目的

三 实验研究

1 实验技术路线图

2 实验材料

3 实验方法

4 实验结果

四 分析与讨论

1 气阴两虚证的研究

2 动物模型的制作

3 阳性对照药物的选择

4 益气养阴固冲方的机理探讨

5 结果分析

五 结 语

1 结论

2 创新点

3 问题与展望

参考文献

致谢

附录1 研究生在读期间科研成果

附录2 实验动物质量合格证

附录3 动物实验设施使用证