盐度影响人工养殖日本鳗鲡性腺发育的机理研究

摘要

鳗鱼是我国重要的养殖鱼类，是我国单项水产品出口创汇最多的种类之一。近年来，我国的鳗鱼养殖产量约占世界鳗鱼养殖产量的70％。日本鳗鲡是所有鳗鱼养殖种类中抗逆性最强、生长速度最快的种类。目前，鳗鱼的人工繁育尚未成功，鳗鱼养殖苗种完全依赖天然鳗苗，而天然鳗苗资源快速衰竭，鳗苗供不应求，价格持续上涨，严重制约了鳗鱼养殖产业的发展。深入开展鳗鱼繁殖生物学基础研究，解决人工繁育技术难题、人工繁育鳗鱼种苗，是解决我国鳗鱼养殖种苗来源的根本途径。 本研究以淡水池塘人工养殖的日本鳗鲡为材料，通过比较驯化到不同盐度条件下的日本鳗鲡的性腺、肾脏、鳃、脑垂体等器官的组织结构特征和血清中与性腺发育相关的激素的水平，分析盐度驯化对日本鳗鲡性腺发育的影响;通过比较驯化到不同盐度的日本鳗鲡在人工注射催熟激素后性腺发育及性腺发育相关激素水平的变化，进一步分析盐度对日本鳗鲡性腺发育的影响，探讨盐度影响人工养殖日本鳗鲡性腺发育的机制，为日本鳗鲡亲鱼培育提供理论依据，为其人工繁殖研究提供新的思路。 研究结果如下: 1.不同盐度条件下，日本鳗鲡肾脏的肾小体直径变化不大，但随着盐度升高，肾小球的血管丛萎缩变得更加紧凑，肾小体囊腔变大。淡水鳗鲡肾小体最大直径89～122μm，其中肾小球直径78～116μm，驯化到海水的日本鳗鲡的肾小体最大直径84～117μm，其中肾小球的直径67～110μm。淡水鳗鲡第一近曲小管(P1)和第二近曲小管(P2)细胞刷状边缘比驯化到海水中的长。淡水鳗鲡远曲小管(D)和集合管(C)磷脂含量较盐度驯化组丰富。随着盐度升高，肾小管上皮细胞高度和细胞核面积均随之减小。 2.驯化到海水中的日本鳗鲡的鳃丝α氯细胞顶膜凹陷与周围的附细胞及扁平细胞共同形成一个顶端小窝。驯化过程中α氯细胞数量增加，由圆形变为柱状，从血管的基部达到鳃丝上皮。β氯细胞数量减少。 3.淡水鳗鲡其垂体前叶吻部的催乳激素分泌区发达，而前叶主部的促性腺激素分泌区较小，催乳激素细胞较多，排列紧密。驯化到海水后，催乳激素分泌区减小，促性腺激素分泌区会有所增加，促性腺激素细胞数量较多，排列较为紧密。 4.雌雄鳗鲡血清中睾酮(T)、雌二醇(E2)、促性腺激素释放激素（GnRH）、卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成激素(LH)在驯化到海水后出现变化。试验组每周体腔注射催熟激素（4mg鲤鱼垂体+100IU人绒毛膜促性腺激素/kg体重，雄鱼剂量为雌鱼的1/2）。雌鱼先处理2周，然后雄鱼开始处理，处理时间9周。雌雄鳗鲡血清中血清激素含量出现显著变化。 5.淡水养殖的日本鳗鲡卵巢处于Ⅰ或Ⅱ期。驯化到海水后卵巢最多可以发育到Ⅲ期。注射催熟激素后，性腺系数和肝体系数均显著提高，消化道系数显著降低。淡水组、1/4海水组、1/2海水组在注射激素后卵巢会进一步发育，但性腺发育到卵黄充满期就出现停滞，只有极少数的卵子可以发育到第Ⅴ期，而全海水组鳗鲡在注射激素后卵巢可以发育到第Ⅴ期，达到性成熟。 6.淡水养殖的日本鳗鲡精巢处于Ⅰ或Ⅱ期。驯化到海水后精巢最多可以发育到Ⅲ期。淡水组的鳗鲡雄鱼在注射激素后精巢可以发育到第Ⅳ期，1/4海水组、1/2海水组和全海水组的精巢可发育到第Ⅴ期，达到性成熟。 7.在本研究过程中，观察到鳗鲡雌雄同体现象。有1尾淡水组鳗鲡在注射3次后，精巢发育到第Ⅳ期，在精巢壶腹腔或壶腹系膜发现卵细胞。卵细胞周围有一层薄的系膜，并不与壶腹腔直接相连。此卵细胞处于第Ⅱ期，细胞直径为53.4μm，细胞核较大，细胞核内有一个大的核仁或数个小的核仁，核仁处于核膜的边缘。

目录

声明

摘要

第1章 引言

1．1 鳗鲡的分类地位和资源概况

1．1．1 鳗鲡的分类地位和种类

1．1．2 鳗鲡的资源概况

1．2 日本鳗鲡繁殖研究概况

1．2．1 鳗鲡的繁殖特性

1．2．2 鳗鱼人工繁育研究历史

1．2．3 鳗鲡亲鱼的催熟和催产

1．2．4 鳗鲡精卵的质量和人工授精的研究

1．2．5 鳗鲡的胚胎发育和仔鳗培育

1．2．6 鳗鲡人工繁殖存在问题的探讨与展望

1．3 鱼类性腺发育及其内分泌调控研究进展

1．3．1 促性腺激素(GtH)

1．3．2 促性腺激素释放激素(GnRH)

1．3．3 促性腺激素释放的影响因子(GRIF)

1．3．4 性类固醇激素

1．4 本研究的目的和意义

第2章 盐度对日本鳗鲡几种器官显微结构的影响

2．1 材料与方法

2．1．1 试验材料

2．1．2 试验方法

2．1．3 试剂的配制

2．1．4 石蜡切片和HE染色

2．2 结果

2．2．1 驯化到不同盐度的日本鳗鲡的肾脏的显微结构

2．2．2 驯化到不同盐度的日本鳗鲡的鳃的显微结构

2．2．3 驯化到不同盐度的日本鳗鲡的垂体的显微结构

2．3 讨论

2．2．1 盐度对日本鳗鲡肾脏显微结构的影响

2．2．2 盐度对日本鳗鲡鳃显微结构的影响

2．2．3 盐度对日本鳗鲡垂体显微结构的影响

第3章 不同盐度下人工催熟的日本鳗鲡的性腺发育

3．1 材料与方法

3．1．1 试验材料

3．1．2 实验方法

3．1．3 试剂的配制

3．1．4 石蜡切片和HE染色

3．1．5 性腺成熟系数(GSI)、肝脏系数和消化道系数的计算

3．2 结果

3．2．1 不同盐度下人工催熟的日本鳗鲡的卵巢发育

3．2．2 不同盐度下人工催熟的日本鳗鲡的精巢发育

3．2．3 日本鳗鲡的雌雄同体

3．3 讨论

3．3．1 盐度对日本鳗鲡雌鱼人工催熟效果的影响

3．3．2 盐度对日本鳗鲡雄鱼人工催熟效果的影响

3．3．3 日本鳗鲡的雌雄同体

第4章 盐度对日本鳗鲡血清中几种性腺发育相关激素水平的影响

4．1 材料与方法

4．1．1 试验材料

4．1．2 试验方法

4．2 结果

4．2．1 不同盐度条件下日本鳗鲡血清T水平的变化

4．2．2 不同盐度条件下日本鳗鲡血清E2水平的变化

4．2．3 不同盐度条件下日本鳗鲡血清GnRH水平的变化

4．2．4 不同盐度条件下日本鳗鲡血清FSH水平的变化

4．2．5 不同盐度条件下日本鳗鲡血清LH水平的变化

4．3 讨论

4．3．1 盐度对日本鳗鲡血清激素水平的影响

4．3．2 盐度对人工催熟日本鳗鲡血清激素水平的影响

致谢

参考文献

在学期间发表的学术论文