基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱的新基质及其应用

摘要

DIOS-MS 技术在低分子量范围内克服了有机基质离子信号的干扰,实现了对小分子化合物和肽段的分析.大多数酶的底物都为小分子化合物,采用DIOS-MS技术检测酶催化底物生成的产物,可以监测酶的催化活性.胰蛋白酶修饰的多孔硅晶片对蛋白的原位酶解和原位肽谱分析提供了一个快速的和灵敏的工具.在对蛋白细胞色素C和牛血清白蛋白的鉴定上,取得了良好的序列覆盖度. 亚胺二乙酸衍生的多孔硅表面可以对含有干扰物如尿素和表面活性剂的蛋白质样品进行预处理,通过清洗其表面,从而实现对蛋白质分子的MALDI质谱分析.此外,衍生化的多孔硅表面还可以转化为铁离子衍生的多孔硅表面,能从磷酸化蛋白酶解产物特异性地和选择性地纯化和富集磷酸化肽段. 筛选出应用于MALDI分析的新基质3,4-二氨基苯基苯甲酮,新基质对样品溶液中的污染物如盐酸胍和尿素表现出相对较好的抗干扰能力.此外,3,4-二氨基苯基苯甲酮在MALDI质谱分析中能有效抑制金属离子的加和现象. 通过电弧法制备的多壁碳纳米管首次用作MALDI基质,用于代替有机基质检测样品分子,发展了碳纳米管上的解吸离子化飞行时间质谱技术分析小分子化合物.在脉冲激光的照射下,碳纳米管充当有机基质吸收能量,然后传递给样品分子,成功实现了对小肽,药物,糖类化合物和核苷类小分子化合物的分析.该方法为MALDI质谱在小分子化合物分析中的应用提供了新的途径.

目录

文摘

英文文摘

第一章文献综述

第一节 基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)

1.1.1 MALDI TOF-MS简介

1.1.2 MALDI TOF-MS发展简史

1.1.3 MALDI基本原理

1.1.4 MALDI基体及其分类

1.1.5 MALDI-TOF-MS的应用

第二节 多孔硅表面的解吸离子化飞行时间质谱(DIOS-MS)

1.2.1前言

1.2.2多孔硅的制备方法

1.2.3多孔硅的特性

1.2.4多孔硅表面的化学反应

1.2.5多孔硅的应用研究

参考文献

第二章多孔硅和衍生化多孔硅表面的解吸离子化飞行时间质谱

第一节多孔硅表面的解吸离子化飞行时间质谱

2.1.1引言

2.1.2实验部分

2.1.3结果与讨论

2.1.4多孔硅应用于MALDI分析小分子化合物

2.1.5小结

第二节胰蛋白酶衍生化的多孔硅表面解吸离子化飞行时间质谱

2.2.1引言

2.2.2实验部分

2.2.3多孔硅表面的衍生化

2.2.4结果与讨论

2.2.5小结

第三节亚胺二乙酸衍生的多孔硅表面的解吸离子化飞行时间质谱

2.3.1引言

2.3.2实验部分

2.3.3结果和讨论

2.3.4小结

第四节金属铁离子螯合多孔硅表面的解吸离子化飞行时间质谱

2.4.1引言

2.4.2实验部分

2.4.3结果和讨论

2.4.4小结

参考文献

第三章基质DABP辅助激光解吸离子化飞行时间质谱

3.1引言

3.2.实验部分

3.2.1生物样品和试剂

3.2.2样品制备和酶解

3.2.3质谱分析

3.3.结果和讨论

3.3.1基质3，4-二氨基苯基苯甲酮(DABP)的表征

3.3.2基质DABP应用于肽段分析

3.3.3基质DABP抗干扰物能力分析

3.3.4基质DABP对复杂样品的分析

3.3.5基质DABP对金属离子加合的抑制作用

3.3.6DABP抑制金属离子加合物形成的机理推测

3.3.7基质DABP应用于磷酸化肽段的分析

3.4小结

参考文献

第四章碳纳米管基质的解吸离子化飞行时间质谱

4.1引言

4.2实验部分

4.2.1仪器和材料

4.2.2样品制备

4.2.3质谱仪器分析

4.3结果与讨论

4.3.1碳纳米管的表征

4.3.2样品点样后碳纳米管层的表征

4.3.3碳纳米管基质的MALDI-TOF MS应用于小分子化合物的分析

4.4小结

参考文献

作者简介及博士学位期间发表的论文目录、著作、专利

致谢