创新药物GDH的质量控制及其在SD大鼠体内血药浓度监测

摘要

GDH是人工合成的黄酮醇糖苷类化合物，药效学研究表明GDH可明显降低高脂模型动物血清TC、LDL-C、ApoB100及ox-LDL水平，具有治疗高血脂症的作用。目前尚处于临床前研究阶段，国内、外未见有关GDH质量控制和药代动力学研究的报道。本文的工作主要是根据药典及相关法规对GDH原料药进行质量控制研究，并根据GDH原料药在药效学研究中确定的最佳给药剂量，采用GDH药物进行低、中、高三个剂量组的单剂量口服给药药代动力学研究，为新药申报和进一步临床应用提供参考依据。
　　一、 GDH原料药的质量控制研究GDH原料药质量研究主要包括性状及理化常数、鉴别、检查和含量测定。
　　性状及理化常数考察结果显示，GDH原料药为淡黄色疏松状粉末，无臭，略具引湿性，比旋度应为-63°至-73°，在二甲基亚砜、N，N-二甲基甲酰胺中易溶，在甲醇、丙酮和乙腈中微溶，极微溶于乙醇，几乎不溶于乙醚和水。
　　采用紫外光谱法、化学反应法、高效液相色谱法对GDH原料药进行鉴别，结果显示GDH原料药与对照品在245nm和360nm处均有最大吸收;盐酸镁粉反应显橙红色;高效液相色谱图中供试品主峰和对照品主峰的保留时间一致。
　　检查项分别考察了水分、干燥失重、有关物质、有机溶剂残留、炽灼残渣、重金属和砷盐等。检查结果显示，GDH原料药的水分含量在8％以内;干燥失重在3.54％～4.15％;遗留残渣不超过0.2％;重金属含量大于百万分之十，小于百万分之二十;砷盐含量小于0.0002％;有关物质检查结果显示GDH原料药中仅含一个杂质，且杂质结构确证为其前体化合物FG-1，采用不加校正因子的主成分自身对照法测定有关物质含量，测得的校正因子为0.45，有关物质含量不超过3％;有机溶剂残留测定结果显示，GDH原料药中含有乙醇残留，但不超过限度，符合规定。
　　建立高效液相色谱法（HPLC）测定GDH原料药的含量，并进行方法研究，方法可行，GDH原料药的最终含量（以无水物计），在98％～102％之间。
　　二、 GDH原料药的血药浓度监测本文建立了快速灵敏的LC-MS/MS生物样品定量分析方法。血浆样品经过蛋白沉淀处理。按照《化学药物非临床研究技术指导原则》的基本要求进行完整的方法学考查，所有生物样品测定的专属性、线性、准确度、精密度、回收率、稳定性等均满足生物样品的定量分析要求。
　　本试验设计了SD大鼠单剂量口服给药GDH原料药15mg/Kg、30mg/Kg和60mg/Kg三个剂量进行药代动力学研究。采用LC-MS/MS方法分别测定了药物在SD大鼠体内不同时间点血浆样品中GDH的浓度。经非房室模型法估算药代动力学参数，GDH的药时曲线的末端相消除半衰期(t1/2)分别为4.97±0.87h、4.78±1.17h、4.08±0.42h;平均驻留时间(MRT)分别为7.75±0.91h、6.86±0.94h、8.73±0.75h;峰浓度（Cmax1）和(Cmax2)分别为217.42±52.49nmL、303.77±120.88ng/mL、280.55±82.21ng/mL,267.28±35.41ng/mL、415.32±65.62ng/mL、633.76±54.69ng/mL， AUC0～36分别为1689.92±238.89ng·h/mL、3039.54±876.59ng·h/mL、5268.98±534.99ng·h/mL; AUC0～∞分别为1699.86±237.6ng·h/mL、3054.14±871.13ng·h/mL、5281.89±535.98ng·h/mL。GDH的AUC0-36、Cmax与给药剂量基本成正相关，相关系数分别为r2=0.8737和r2=0.8994。可认为在该三个剂量水平下，GDH体内药代动力学行为是线性的。

目录

声明

摘要

前言

第一章 创新药物GDH的质量控制研究

1 GDH的理化性质及鉴别

1．1 药品批号及来源

1．2 性状

1．3 物理常数

1．4 鉴别

1．5 小结

2 GDH的检查

2．1 水分

2．2 炽灼残渣

2．3 重金属

2．4 砷盐

2．5 有关物质

2．6 溶剂残留

2．7 小结

3 GDH的含量测定

3．1 GDH对照品标化

3．2 GDH含量测定仪器设备

3．3 含量测定色谱条件

3．4 GDH含量测定测定方法与溶液配制

3．5 GDH含量测定方法学考察

3．6 样品实测

3．7 小结

第二章 GDH在SD大鼠体内血药浓度测定

1 仪器与试剂

2 血浆样品中GDH测定的LC／MS／MS分析

2．1 血浆样品预处理

2．2 色谱条件

2．3 质谱条件

3 方法学验证

3．1 专属性

3．2 标准曲线，定量限与检测限

3．3 分析方法的精密度

3．4 绝对回收率

3．5 基质效应

3．6 稳定性

3．7 方法学小结

4 实验方法

4．1 动物实验设计

4．2 数据分析

4．3 数据处理

4．4 单剂量给药GDH在sD大鼠体内药代动力学参数

4．5 单剂量给药GDH在SD大鼠体内的线性关系研究

5 小结

总结与展望

参考文献

致谢

文献综述 黄酮类化合物的构效关系与药理活性的研究进展

作者简历