应用容量法监测花粉浓度及花粉过敏原交叉反应的研究

摘要

背景： 花粉是诱发季节性过敏性鼻炎和哮喘的主要过敏原之一，患者症状与花粉浓度明显相关，患者的症状随花粉浓度的升高而加重，因此花粉监测具有重要临床价值。花粉预报是花粉监测的重要目的之一，花粉预报需要长期积累花粉监测资料，明确每年各种花粉季节的特征。对花粉浓度进行分级可使花粉报告更直观而容易理解。 豚草和蒿草同属菊科，蒿属花粉是北京夏秋季重要的气传过敏原之一，而豚草属花粉则较少见，但临床上发现，许多蒿属花粉过敏患者的血清中存在豚草花粉特异性IgE抗体，研究花粉过敏原交叉反应，对于此类患者进行特异性免疫治疗有较大的指导价值。 目的：明确本市春秋季具有代表性的气传花粉的浓度及各花粉季节特征；对春秋两季重要的致敏花粉—柏科及蒿属花粉浓度分级进行初步探讨；明确豚草与蒿草花粉过敏原间是否存在交叉反应。 方法： 1.应用Burkard采样器对北京市2007年3月至10月间的气传花粉浓度进行监测； 2.选择单一柏科，单一蒿属花粉过敏患者，对其病情进行随访，并与同时期柏科、蒿属花粉浓度分别进行统计学分析，依据患者的病情积分，对柏科及蒿属花粉浓度进行分级，并建立柏科及蒿属花粉分级标准； 3.根据蒿属及豚草属花粉过敏原检测结果，将患者分为：A组Ar+/Am—；B组Ar+/Am+；随机选取A、B两组各5名患者血清，进行免疫印迹试验；以大籽蒿、三裂叶豚草花粉过敏原提取液为抑制物，分别进行RAST抑制试验及免疫印迹抑制试验，对B组患者血清中的豚草及蒿草花粉特异性IgE进行分析，以明确两种花粉间是否存在交叉反应。 结果： 1.2007年3月至10月共记录两个花粉浓度高峰，分别为3月至5月的春季、8月至10月的夏秋季。全年气传花粉分布有明显的种属差异，春季以树木类花粉为主，而夏秋季以杂草类花粉为主，其中春季气传总花粉最高浓度为315g/m3，夏秋季气传总花粉最高浓度为944g/m3：气传花粉的构成：杂草类花粉占全部花粉计数的56％，树木类花粉占全部花粉计数的42％，牧草类花粉约占全部花粉计数的2％； 2.春季(3月至5月)气传花粉：从2007年3月1日至5月31日，气传花粉构成比：构树属花粉(22％)，白蜡属花粉(21％)，柏科花粉(16％)，杨属花粉(8％)，桦木科花粉(7％)，银杏花粉(6％)，柳属花粉(6％)，栎属花粉(5％)，松树花粉(4％)，及其他(5％，包括桑树、臭椿及其他未识别)； 3.夏秋季(8月至10月)气传花粉构成：北京地区秋季气传花粉主要由大麻葎草属(51％)、蒿属花粉(31％)，藜苋科花粉(14％)构成； 4.根据国内学者多年花粉检测结果，以及参考国外文献，推算2007年北京市常见气传花粉的花粉季节特征：柏科花粉季节起止时间为3月13日至4月12日，季节内最高浓度293g/m3，季节内平均浓度36g/m3，季节内花粉总数16070粒；白蜡属花粉季节起止时间为4月5日至5月5日，季节内最高浓度177g/m3，季节内平均浓度46g/m3，季节内花粉总数20534粒；桦木花粉季节内最高浓度45g/m3，季节内平均浓度13g/m3，季节内花粉总数4867粒；大麻葎草属花粉季节始于8月8日，止于10月6日，季节内最高浓度672g/m3，季节内平均浓度115g/m3，季节内花粉总数107136粒；蒿属花粉季节始于8月8日，止于10月8日，季节内花粉最高浓度为267g/m3，日平均浓度为71g/m3，季节内花粉总数63389粒；根据各种花粉的花粉季节特征，建立北京市常见气传花粉日历； 5.柏科花粉浓度与单一柏科花粉过敏患者症状严重程度存在明显相关，Spearman相关系数为0.804，P<0.001。依据患者症状积分，将柏科花粉浓度分为4级：低≤9g/m3：中≥10g/m3：高≥20g/m3：极高≥70g/m3； 6.蒿属花粉浓度与蒿属花粉过敏患者症状严重程度存在明显相关，Spearman相关系数为0.847，P<0.001。依据患者症状积分，将蒿属花粉浓度分为4级：低≤14g/m3；中≥15g/m3：高≥40g/m3：极高≥120g/m3； 7.在蒿属花粉阳性患者123例中，同时合并豚草阳性的28人(22.8％)：而在豚草花粉阳性的患者28人中，均同时合并蒿草阳性(100％)：Art+/Am—及Art+/Am+两组患者均能识别大籽蒿花粉变应原42kd，30kd，22kd，12kd；对Art+\Am+组患者可识别三裂叶豚草花粉变应原40kd，20kd，12kd；对Art+/Am+组3名患者进行RAST抑制试验，经过豚草花粉预孵后，三名患者蒿草花粉sIgE最大抑制率均低于50％；经过蒿草花粉预孵后，两名患者豚草花粉sIgE最大抑制率低于50％，而另一位患者豚草花粉sIgE最大抑制率为83％。对这3名患者进行蒿草免疫印迹抑制试验表明，蒿草花粉可抑制豚草花粉12kd小分子蛋白，而40kd及20kd蛋白不能被蒿草蛋白抑制。 结论： 1.首次应用Burkard采样装置对北京市气传花粉的浓度进行监测，并明确了各气传花粉季节的特征，为应用容量法进行花粉预报奠定了基础； 2.依据单一花粉过敏患者的症状积分，首次尝试对气传柏科及蒿属花粉浓度进行分级，为花粉报告及患者自我防护和治疗提供依据； 3.杂草类及树木类花粉是北京市主要的气传花粉； 4.大麻葎草属、蒿属花粉是北京市夏秋季最主要的气传花粉，豚草花粉不是本地主要气传花粉； 5.三裂叶豚草、大籽蒿花粉约12kd的小分子蛋白之间存在交叉反应； 6.三裂叶豚草、大籽蒿花粉主要致敏蛋白分子之间不存在交叉反应。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：中英文缩略词表

声明

第一部分应用Burkard采样器对北京地区气传花粉浓度的监测

前言

材料与方法

1仪器与材料

2花粉浓度的监测

3花粉季节起止日期的推算

结果

1 2007年北京地区气传花粉浓度监测概况

2春季(3月至5月)气传致敏花粉监测

3夏秋季(8月至10月)气传致敏花粉监测

4 2007年北京地区主要气传花粉季节特征

5 2007年北京地区主要气传花粉日历

6Burkard采样器获得的花粉实物照片

讨论

结论

第二部分柏科花粉浓度与临床症状的关系

前言

研究对象及方法

1花粉浓度监测

2研究对象

3统计分析

结果

1研究对象基本情况

2花粉浓度与患者病情积分关系

3柏科花粉浓度分级

讨论

结论

第三部分蒿属花粉浓度与临床症状的关系

前言

研究对象及方法

1花粉浓度监测

2研究对象

3统计分析

结果

1研究对象基本情况

2花粉浓度与患者病情积分的关系

3蒿属花粉浓度分级

讨论

结论

第四部分蒿属花粉与豚草花粉交叉反应性的研究

前言

材料与方法

1研究对象

2材料与方法

结果

1蒿草/豚草花粉过敏患者一般情况

2花粉蛋白浓度测定

3免疫印迹试验

4 RAST抑制试验

5三裂叶豚草花粉变应原免疫印迹抑制试验

讨论

结论

参考文献

综述气传过敏监测

附录

致谢