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消毒剤によるウィルスタンパク質損傷の評価へ向けた定量プロテオ一ム解析手法の構築

机译:评价消毒剂引起的病毒蛋白损伤的定量蛋白质组分析方法的构建

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摘要

ウィルスには地域による分布の違いや流行種の移り変わりがあり、水道原水に対して常に適切な浄水処理方法を選択するためには、不活化機構の理解を深める必要がある。従来は消毒処理前後のウィルスに対し感染価測定とともに定量PCRを中心とする遺伝子解析を併用し、DNAまたはRNAの損傷を定量することで感染価低減の根拠付けが試みられてきた。一方で、電気泳動、質量分析といった解析技術の向上や生化学的データの蓄積が進むとともに、もう一つの不活化要因であるタンパク質損傷の解析がアプローチされつつある。ウィルスは種によってタンパク質の種類、大きさ、数などが様々であるため、多くの種に対して汎用的な方法を構築する必要がある。本研究では、消毒に伴うウィルス不活化機構の解明に取り組むための研究手法構築を目的とした。具体的には、バクテリオファージMS2を用いてウィルス試料の調整方法検討、及び質量分析法によるタンパク質損傷の定量化を試みた。
机译:病毒因地区而异,具有不同的分布和流行病种,因此有必要加深对灭活机理的了解,以便始终为自来水选择合适的净水方法。常规上,已经尝试通过使用以定量PCR为中心的基因分析以及在消毒处理之前和之后对病毒的感染滴度的测量来定量DNA或RNA损伤来证明降低感染滴度的合理性。另一方面,随着诸如电泳和质谱分析技术的改进以及生化数据的积累,蛋白质损伤的分析是另一种失活因素,其正在被研究。由于病毒根据物种而在蛋白质类型,大小,数量等方面有所不同,因此有必要为许多物种构建通用方法。这项研究的目的是构建一种研究方法,以阐明与消毒有关的病毒灭活机理。具体而言,我们研究了使用噬菌体MS2制备病毒样品的方法,并尝试通过质谱定量蛋白质损伤。

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