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PAGポリマー担持基材を用いた培養細胞単層の光切断•細分化プロセシング

机译:使用PAG聚合物支持的底物对培养的细胞单层进行光裂解•细分处理

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摘要

ヒトiPS細胞の樹立により、同種·自家細胞のヒト への利用への道が開けたことをきっかけに、これらヒト由来細胞を用いた高精度の薬物スクリーニングや 疾病メカニズム解明が、近年盛hに検討されてきてい る。こうした目的に最適化されたモデル細胞系を 量産•標準化することへのニーズが急速に高まってい るが、それに応える上で重要となるのが、細胞の精密 プロセシングとその自動化である。しかしながら、 幹細胞及びそれらから派生する多くの培養系では、培 養細胞が互いにつながった状態で混在し、そのハンドリングを困難なものとしている。実際、ヒトのES細 胞やiPS細胞の未分化維持培養においては、コロニー 状に増殖した細胞を、アポトーシスを避けるために単 細胞にまでバラバラにせず、適度な大きさの細胞塊に まで細分化された状態で継代することが一般的であるが、その際、ピペッティングによる剪断応力の印加 や、ピンセットやローラーカッターを用いた切断など の手法が用いられる。このような「力ずく」とも言う べき物理操作は、酵素処理や培地交換といった液体の ハンドリングと異なり、自動化するのが困難であるた め、もっぱら操作者の手技に頼るのが現状である。さ らにこうした操作で生じるばらつきが、培養系を不均 一なものにしている。
机译:随着人iPS细胞的建立,同种异体和自体细胞被人类使用的途径已经打开,并且近年来已经积极研究了使用这些人源性细胞进行的高精度药物筛选和疾病机理的阐明。为达到这些目的而优化的模型细胞系的批量生产和标准化的需求正在迅速增长,精确的细胞处理及其自动化对于满足这一需求非常重要。然而,在干细胞和许多衍生自它们的培养系统中,培养的细胞以连接状态混合,这使其难以处理。实际上,在人类ES细胞和iPS细胞的未分化维持培养中,在集落中增殖的细胞没有被分离成单个细胞以避免凋亡,而是被细分成适当大小的细胞簇。但是,此时使用诸如通过移液施加剪切应力并用镊子或滚刀切割的方法。与诸如酶处理和介质交换之类的液体处理不同,这种可以称为“力”的物理操作很难实现自动化,因此当前的情况是它们仅依赖于操作员的程序。此外,由这些操作引起的可变性使培养系统不均匀。

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