ファージディスプレイ法を用いたShewanella algae菌体特異的ぺプチドの選抜と菌体回収への適用

摘要

環境中に存在する特定微生物を回収するための技術の確立を目的に，12-merのランダム配列のぺプチドを提示するファージディスプレイペプチドライブラリを利用したファージディスプレイ法をShewanella algae菌体に供し，本技術の適用可能性を検証した.S.algae此菌体に対してバイオパンニングを2ラウンド行い，得られた溶出ファージのプラークを形成させて単一のクローンを増やし，Tyramide Signal Amplification法による蛍光シグナル検出にて各種ファージクローンの標的菌体への結合特異性を網羅的に解析した.溶出ファージのうち標的菌体への結合特異性が高いと判断したクローンを4種選抜し，4種のファージクローンをそれぞれ使用した磁気ビーズ法による標的菌体の回収を行った.その結果，すべてのファージクローン回収系においてべプチド未提示ファージを使用した回収系より有意に標的菌体を回収することが可能であった.このことより，ファージディスプレイべプチドと磁気ビーズを併用することで特定の微生物を高濃度に回収可能な技術として適用できる可能性が示された.