利用环介导等温扩增技术快速检测贝类中的派琴虫

摘要

目的：为满足沿海贝类养殖场开展派琴虫流行病学调查以及口岸进出境贝类、贝类产品派琴虫检疫需要，建立派琴虫病环介导等温扩增(LAMP)检测方法。rn 方法：选择派琴虫保守的rDNA的ITS-2区域设计LAMP引物，通过对反应体系和反应条件的优化，建立了派琴虫LAMP检测方法，同时进行了敏感性和特异性试验。利用所建立的LAMP方法对采自我国东海和黄海的60份贝类样品进行派琴虫检测，并与RFTM培养法检测结果进行比较。rn 结果：所构建方法检测质粒模板DNA的动态范围为1×107～1×101拷贝，敏感度可检测到10拷贝质粒DNA，而且与包拉米虫、单孢子虫、小瓜虫等寄生虫无交叉反应，也不受贝类组织DNA的干扰。60份贝类样品的LAMP检测结果表明所建立LAMP检测方法的敏感性高于RFTM培养法。rn 结论:本研究所建立的派琴虫环介导等温扩增检测方法敏感、特异而且快速，可以应用于口岸派琴虫的检测。