PRRSV GP5基因RNA的体外转录合成及其靶脱氧核酶的初步筛选

摘要

为探讨脱氧核酶在抑制PRRSV复制研究，利用体外转录方法制备PRRSV GP5基因RNA并用该RNA对其所设计靶脱氧核酶进行初步筛选。通过构建含有T7启动子序列的GP5基因的重组质粒，用RiboMAXTM T7 Express System体外转录试剂盒成功制备了高纯度的GP5基因RNA，经体外剪切筛选出具有体外切割活性的2种脱氧核酶，其中DZ-12具有高效切割活性，为进一步研究脱氧核酶在细胞水平、体内水平剪切GPS基因mRNA,抑制PRRSV GP5基因的蛋白表达奠定了基础，并有望应用于抗病毒药物开发和转基因动物研究。