茶树SRAP反应体系优化及引物筛选

摘要

以茶树叶片DNA为模板，采用正交试验设计，以M92、引物、dNTP、TaqDNA聚合酶、模板DNA 5种因素5个水 平，对茶树SRAP反应体系进行了研究，建立了茶树SRAP最佳反应体系。结果表明，茶树SRAP最佳反应体系为：Mg+22.0mmol/L、引物各0.5μmol/L、dNTP0.1mmol/L、TaqDNA聚合酶0.5u/μL、模板DNA 4ng/μL，总体积为10μL。运用该体系，从128个SRAP引物组合中筛选出扩增条带清晰、多态性丰富的56个引物组合。这一体系的建立及引物组 合的筛选为今后利用SRAP标记技术进行茶树分子遗传学研究提供了理论依据。