山羊高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ的克隆、生物信息学和组织表达谱分析

摘要

本实验旨在对山羊高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ(chGMⅡ)进行生物信息学和组织表达谱分析.采用反转录PCR技术克隆chGMⅡ的cDNA序列,利用荧光定量PCR技术进行组织表达谱分析,并利用生物信息软件对其蛋白结构进行预测.首次获得chGMII的含3432 bp开放阅读框的cDNA序列.生物信息学预测发现,chGMII分了量约130kDa,无信号肽序列,含有1个跨膜结构域,SWISS-MODEL同源建模得到chGMⅡ的三级结构,分子对接获得chGMⅡ与其底物结合的空间结构.组织表达谱分析表明chGMⅡ在脾脏的表达量最高.本实验为探讨GMII的酶的作用机理及后续抗癌制剂的研制打下了提供资料.