高胰岛素水平对RAW264.7细胞胆固醇酯蓄积的影响及可能机制

摘要

目的:探讨高胰岛素水平对巨噬细胞内胆固醇酯蓄积的影响及其可能机制.方法:培养的小鼠源性巨噬细胞RAW264.7,采用chol:MβCD(10μg/ml)和不同浓度胰岛素进行干预后,用油红α染色法和酶荧光法检测细胞内胆固醇酯蓄积情况;RT-PCR检测胆固醇调节元件结合蛋白-1(SREBP-1)、激素敏感脂肪酶(HSL)、酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶-1(ACAT-1)mRNA表达水平,WB检测其蛋白表达水平.结果:与低糖组(smmol)相比，高糖处理组(25mmol)并没有进一步促进cho1:MβCD中脂质成分在巨噬细胞内的蓄积;但当培养基内胰岛素异常增高时(10-6mol/L)，巨噬细胞内总胆固醇及胆固醇酷水平较生理浓度胰岛素组(10-9mo1lL,NI组)显著增高;同时mRNA和蛋白水平检测发现，HI组SREBP-1表达明显增加，HSL表达降低，但ACAT1表达无明显变化。而SREBP-1基因沉默可下调HI组巨噬细胞内的胆固醇酷的含量;HSL表达明显增加。结论:胰岛素水平异常增高将上调巨噬细胞内SREBP-1表达，进而抑制HSL的表达，减少细胞内胆固醇酯的分解，促进细胞内胆固醇酯的堆积，最终加速细胞泡沫化。