禽流感病毒RT-LAMP可视化检测技术的建立

摘要

根据GenBank中的禽流感病毒(AIV)-M基因序列，设计针对所有亚型AIV的通用检测引物，并对反应条件进行优化，建立了检测AIV的逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)可视化检测方法。结果表明，建立的检测方法对禽流感病毒总RNA最小检出限是10fg，灵敏度是RT-PCR的1000倍，能特异地检测出所有不同HA亚型禽流感病毒而对其它禽呼吸道病原体无扩增反应，反应迅速，在常规水浴锅或金属恒温槽中50分钟就可完成，反应结束后不需开盖即可直接用肉眼根据反应液的颜色变化而对结果进行判定。本研究建立的禽流感病毒RT-LAMP可视化检测方法具有操作简便、仪器设备要求简单、灵敏、快速、特异等优点，适合在基层进行AIV的快速早期筛检。