乳糖诱导剂对重组C型产气荚膜梭菌a毒素基因表达的影响

摘要

采用限制性核酸内切酶酶切鉴定含α毒素基因的重组质粒，用SDS—PAGE检测不同条件下α毒素基因的表达情况。经酶切鉴定证实重组质粒pXETA02含有α毒素基因且基因序列和阅读框架正确。以乳糖诱导α毒素基因表达的优化条件是：培养基pH7．0，培养温度37℃，菌体生长密度OD600达到1．0时分批添加0．5g/L乳糖，诱导5h，此时目的蛋白表达量为23％，实现了α毒素基因的高效表达。从而为C型产气荚膜梭菌α-毒素基因工程菌苗的生产工艺研究提供了可靠的试验数据。