内蒙古中东部地区乳源性大肠杆菌PCR检测及其耐药性分析

摘要

目的:分离牛乳源性大肠杆菌(E.coli)并进行PCR检测及耐药性分析。方法:根据GenBank上公布的牛源致病性大肠杆菌(E.coli)基因序列,利用Primer5.0和DNAMAN生物信息学软件,根据该致病菌基因组序列16S-23S rRNA间隔区保守序列设计并合成1对引物,对牛乳中分离的大肠杆菌进行基因扩增、序列测定,同时利用琼脂平板扩散方法分析阳性菌株的耐药状况。结果:结果表明扩增片段由396bp组成,大小与预期片段大小相符,测序结果与GenBank上公布的牛源菌株E.coli(X80731.1)基因序列相似性达到97.22%,与标准菌株E.coli(CVCC247)的基因序列相似性为100%。分离菌株普遍对卡那霉素、氧氟沙星、氟哌酸高度敏感,而对四环素、氨苄青霉素表现高度耐药。结论:成功分离出牛乳源大肠杆菌菌株,同时掌握了耐药状况,为进一步建立牛乳中致病性大肠杆菌的分子检测方法及指导临床合理用药行为提供了可靠的实验依据。

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