宿主蛋白LSm1-7复合体在登革病毒RNA复制中作用的初步研究

摘要

目的：探讨LSm1-7复合体在登革病毒(DENV) RNA复制中的作用。方法：DENV感染HepG2细胞后，在不同时间点(2hr、24hr、36hr、48hr)收集细胞和提取总mRNA，实时定量PCR (RT-qPCR)分析1sm-1表达水平；将1sm-1的siRNA和非特异对照siRNA两次转染HepG2细胞后感染DENV-2，24hr后收集细胞,提取总mRNA，RT-qPCR分析1sm-1表达水平与病毒RNA表达水平；利用LSm-1抗体与dsRNA抗体对DENV感染细胞进行免疫荧光染色，激光共聚焦分析LSm-1与dsRNA共定位情况。结果：与2hr时相比，随着时间的推移，DENV-2 RNA和LSm1 RNA水平逐渐升高；与对照组siNC相比，siLSm1组LSm1 RNA水平明显降低，沉默效率达78.2%；与对照组siNC相比，siLSml组DENV RNA含量降低35.6%；LSm1-7复合体在DENV感染HepG2细胞后募集到核周围，与DENV dsRNA共定位。结论：LSm1-7复合体可能作为DENY复制复合物的组成部分，正调控DENV RNA的复制。