华东地区H5N1亚型禽流感病毒分子流行病学调查

摘要

在2014-2015年,本实验室对华东部分地区分离到的H5N1亚型禽流感病毒(Avian Influenza Virus,AIV)进行遗传进化分析,以探究在这一地区H5N1亚型禽流感的流行趋势,为国内高致病性禽流感的预防和控制提供重要的信息.自2014年9月，在华东地区采集棉试子2513份，共分离到29株H5NI亚型AIV，分离率为1.15%。其中26份来自于鸡，2份来源于鸭，1份来源于鸽子。HA序列测定与分析表明，29株H5Nl病毒裂解位点均为PQRERRRKR↓GLF，有多个碱性氨基酸的插入，符合HPAIVs的特征。遗传进化树表明其全部属于clade2.3.2.lc分支，而当前防控该分支的Re-6疫苗属于clade2.3.2.1b分支，两者之间存在明显的遗传距离。与2013年分离到的clade2.3.2.1c分支毒株比较发现，这29株H5N1亚型AIV的HA序列中，27株均出现了L75W、T801、A93V、D95G、L133M、N144K、D158N、N159D、A160T、G167D、I178V、E188K、T1921、K193T、I285V氨基酸位点的改变；其中144、158和160位氨基酸的突变，导致144-147位糖基化位点缺失，158-161位新增；蛋白受体结合位点的分析显示，29株病毒HA基因的226位氨基酸均为谷氨酸(Q)、228位均为甘氨酸(G)，倾向于识别嗜禽的α2，3-唾液酸受体。HI试验表明，与2013年毒株相比，Re-6抗血清对clade2.3.2.1c分支毒株的中和能力明显下降；免疫保护试验显示，攻毒后3d在口腔和泄殖腔中即可检测到显著排毒，说明Re-6疫苗对该分支病毒所引发疫病的保护性不强。因此，推测clade2.3.2.1c分支H5NI亚型AIV发生了较为显著的抗原性变异，有潜在大流行的风险，故开发与当前流行株对应的疫苗显得尤为重要。