吡格列酮对高糖环境中系膜细胞megsin表达及细胞外基质降解作用的影响

摘要

目的:本研究通过药物干预,观察吡格列酮(pioglitazone)对高糖环境中megsin、MMP-2、PAI-1及IV型胶原表达的影响,为进一步探讨megsin在糖尿病肾损害中发病中的作用及其防治提供新的途径.方法:取小鼠系膜细胞种植于96孔板,采用MTT法分别检测低糖、高糖及干预药物吡格列酮对系膜细胞增殖状态的影响.采用6孔板和25cm2塑料培养瓶培养细胞，将细胞分成3组:低糖组(A组)、高糖组(B组)、高糖+A比格列酮组(C组)。免疫细胞化学及蛋白印记结果显示，与A组相比，B组从12小时开始，小鼠系膜细胞megsin、PAI-1表达及蛋白水平开始升高(P<0.01),48小时达高峰，C组与B组同期相比，megsin及PAI-1表达减弱及蛋白水平降低(P<0.01);从12小时开始，B组较A组EMMPRIN,MMP-2表达减弱及蛋白水平下降(P<0.01),48小时达高峰，C组与B组同期相比，EMMPRIN,MMP-9表达增强及蛋白水平升高，具有统计学差异(P<0.01);从12小时开始，与A组相比，B组小鼠系膜细胞上清液中IV型胶原浓度(细胞总蛋白校正)开始升高，48小时达高峰(<0.01),C组与B组同期相比，系膜细胞上清液中IV胶原浓度明显下降(P<0.01)。结论:吡格列酮能够抑制高糖环境下肾小球系膜细胞中megsin的表达，继而使EMMPRIN及MMP-2的表达上调，抑制了PAI-1的活性及IV型胶原的分泌。吡格列酮对肾脏保护作用的机制可能部分通过PPAR-γ-AP-1通路抑制了肾小球系膜细胞中megsin基因的表达，促进了细胞外基质的降解而完成。