高良姜DXR基因克隆与表达分析

摘要

目的:克隆高良姜1-脱氧-D-木酮糖5-磷酸还原异构酶(DXR)的全长cDNA,分析其组织表达模式,为通过基因调控和转基因改良高良姜品质奠定基础.方法:应用简并引物RT-PCR和RACE技术从高良姜根茎中克隆DXR全长cDNA,运用生物信息学解析其编码的蛋白质结构,实时荧光定量PCR法分析其组织表达模式.结果:克隆了高良姜DXR全长cDNA序列(AoDXR),开放读码框长1419 bp,编码的蛋白质含472个氨基酸残基、相对分子质量约51.48 kDa.推导的AoDXR氨基酸序列与其他高等植物的DXR具有高度的序列相似性(73％～99％).AoDXR在高良姜叶片中表达量最强,而在根茎中表达量较弱.结论:AoDXR在高良姜根茎中的表达水平与1,8-桉油精的积累不一致,反应了AoDXR催化的终产物的多样性和表达调控的复杂性.