转基因细胞法测定重组人脑利钠肽生物学活性

摘要

目的:建立转基因细胞法检测重组人脑利钠肽的生物学活性.方法:构建BNP受体超表达的HEK293单克隆细胞株;建立竞争ELISA法检测细胞培养液中cGMP含量变化;对新建方法的特异性、稳定性进行评价,并与兔主动脉条法比较.结果:新建方法剂量反应曲线符合四参数方程,R2大于0.94.P5,P18和P65三个不同代次细胞的EC50值无明显差异,且RSD均低于20％.对同一样品测定5次,兔主动脉条法RSD为65.9％,而新建方法仅为5.8％.结论:新建方法操作简便,具有较好的特异性,重复性和稳定性,可作为替代方法应用于重组人脑利钠肽的生物学活性测定.