大肠杆菌ptsG基因的敲除及其对phe生产的影响

摘要

L-phe是重要的食品和医药中间体,利用大肠杆菌发酵葡萄糖生成phe时,对葡糖糖转运起重要作用的磷酸烯醇丙酮酸糖磷酸转移酶系统(PTS)对phe产量合成有很大影响,在大肠杆菌PTS系统中,葡糖糖主要由ptsG基因编码的葡萄糖特异性转运蛋白EⅡCB610转运入细胞,通过基因敲除技术获取pts缺陷菌株,可以减少菌株对葡糖糖的摄取速率,减少乙酸的生成,利于菌株的高密度发酵和重组蛋白和相关代谢中间物获得.采用Red同源重组技术将大肠杆菌染色体上的ptsG基因进行敲除,得到PTS缺陷菌株.该菌株在以葡萄糖为唯一碳源的培养基中摇瓶培养,菌密度为对照菌株的0.35倍,phe产量提高12％.