HPLC在测定人体血液中哌拉西林药物浓度的应用

摘要

目的：通过高效液相色谱法测定人体血液中哌拉西林的浓度,从而对哌拉西林建立起有效的测定方法,可以为临床合理使用哌拉西林提供一定的理论依据。方法：本文采用高效液相色谱法进行分析测定,在血浆样品中加入内标1-安息香肟后用乙腈沉淀蛋白,取上清液于室温下用氮气吹干仪吹干,残余物用流动相复溶后进样分析。色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶填充剂WatersC18(250mm×4.6m,5 μm),流动相为乙腈-0.11％四丁基氢氧化铵溶液(用磷酸调至pH3.5)=33∶67；流速为0.8mL·min-1；紫外检测波长为230nm；泵压为1700psi；灵敏度：0.0002 (AUFS)；柱温：室温；进样量50μL。结果：本法最低检测浓度为0.5μg·mL-1；哌拉西林在0.5～100 μg·mL-1之间线性关系良好 Y=0.053x+0.057,r=0.9997,重复性试验RSD为0.27％,小于2％,重复性良好。日内精密度为1.32％,日间精密度为1.96％,均小于5％。血浆中的内源性物质对哌拉西林和内标1-安息香肟均无干扰,各组分峰均能得到较好的分离。平均提取回收率为96.06％,RSD=2.43％;平均方法回收率为94.44％,RSD为2.71％。结论：本法简便、准确性高、灵敏度高、专属性和重现性好,高效液相色谱法可用于临床中哌拉西林血药浓度测定及临床药动学和生物等效性的研究。