IBV商品疫苗株与广西流行野毒株鉴别方法的建立

摘要

根据鸡传染性支气管炎病毒(IBV)3'端非编码区和S1基因保守区域设计两对特异性引物,对H120、Ma5和4/91、M41等常用疫苗株以及26株广西田间分离株进行二重RT-PCR扩增,并进行该方法的特异性和敏感性试验,同时对此方法进行了初步应用.结果表明,经此两对引物扩增后,M41毒株得到约160bp的目的片段,Mass型毒株得到约370bp的目的片段,4/91型IBV毒株得到约480bp和345bp两条目的片段,其它24株广西分离株得到一条大小在260bp-345bp的目的片段;特异性试验表明此二重RT-PCR方法不能扩增NDV、AIV、MDV、IBDV、ALV等;敏感性试验表明最低检测量达到100pg.该方法的临床应用表明,攻毒鸡病料阳性率达90％.本研究结果表明了所建立的二重RT-PCR方法可以鉴别IBV疫苗株与广西流行野毒株,且特异性强、敏感度高.