茶树CsWRKY57like调控EGCG3'Me生物合成的机制分析

摘要

从茶树叶片中克隆得到1个WRKY转录因子,命名为CsWRKY57like.氨基酸序列比对及进化树分析发现CsWRKY57like具有一个典型的WRKY结构域,且与拟南芥WRKY57和已报道的CsWRKY57同源性较高,同属于第Ⅱ类c亚族.实时荧光定量PCR表明CsWRKY57like的表达与EGCG3"Me的积累规律一致,均在高EGCG3"Me含量的茶树品种中明显增强.亚细胞定位和转录活性分析显示CsWRKY57like定位于细胞核,是一种核蛋白,并且具有转录激活活性.体外凝胶阻滞试验(EMSA)及双荧光素酶瞬时表达分析显示,CsWRKY57like能与EGCG3"Me生物合成相关基因CsLAR,CsDFR和CCoAOMT启动子区域的W-box(C/T)TGAC(T/C)元件结合,并激活它们的活性.这些结果表明CsWRKY57like可能通过直接调控CsLAR,CsDFR和CCoAOMT等相关基因的表达来参与EGCG3"Me生物合成的过程,加深了对茶树EGCG3"Me生物合成转录调控机制的认识,为特异性茶树种质资源的选育奠定了理论基础.