巨噬细胞对内皮细胞凋亡的影响及通心络干预研究

摘要

目的：研究不同亚型巨噬细胞对内皮细胞凋亡的影响及通心络的干预作用. 方法：实验分为5组：对照组、PMA组、M2组、M1组、通心络组.采用PMA(5μg·L-1)分别联合IL-4(100μg-L-1)、LPS(200μg·L-1)诱导THP-1细胞分别向M2、M1型巨噬细胞极化并给以通心络(TXL,300mg?L-1)进行干预,采用酶联免疫吸附方法检测其标志分子白介素-10(interleukin-10,IL-10)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)的表达.取巨噬细胞培养上清作为条件培养基培养内皮细胞,采用流式细胞仪检测内皮细胞凋亡率、蛋白免疫印迹方法检测凋亡相关蛋白(caspase3、bax、bcl-2)的表达. 结果：与正常组比较,M2组细胞培养上清中IL-10水平升高(P＜0.01);M1组细胞培养上清中IL-10水平明显降低,IL-6、TNF-α水平明显升高(P＜0.01);与M1组比较,通心络组细胞培养上清中IL-10水平升高,IL-6、TNF-α水平下降(P＜0.01).与M2组内皮细胞比较,M1型巨噬细胞细胞培养的内皮细胞凋亡率显著升高(P＜0.01),促凋亡蛋白caspase3、bax的表达显著升高(P＜0.05,P＜0.01),抗凋亡蛋白bcl-2的表达降低(P＜0.01),与M1组比较,通心络组内皮细胞的凋亡率显著降低(P＜0.01),促凋亡蛋白caspase3、bax的表达降低(P＜0.05,P＜0.01),抗凋亡蛋白bcl-2的表达升高(P＜0.01). 结论：通心络可以抑制巨噬细胞向M1型极化.M2型巨噬细胞培养上清对内皮细胞的凋亡无明显影响,M1型巨噬细胞培养上清可以促进内皮细胞凋亡;通心络预培养的M1型巨噬细胞培养上清培养的内皮细胞凋亡率显著下降.