从24-脱氢胆固醇还原酶在内质网膜上的空间定位角度对其抗细胞凋亡功能的机制研究

摘要

为了研究其拓扑空间结构以及其定位是否对其发挥ROS清除功能产生影响，本文采用荧光蛋白酶保护法研究其拓扑空间结构，并对转染过的细胞施加HzOz刺激，用细胞内活性氧荧光指示剂H2DCFHDA检测细胞内ROS水平。FPP法分析结果显示DHCR24的N-末端位于内质网腔侧，C-末端位于细胞质侧。研究表明DHCR24的抗细胞凋亡功能是通过其可以作为caspase-3的底物来实现的，本研究采用免疫化学荧光法证明了H20:刺激条件下caspase-3被激活，暗示DHCR24蛋白caspase3切割位点朝向胞浆一侧为其阻断凋亡信号通路所必需。