重组酶介导的恒温扩增法检测非结核分枝杆菌的建立方法研究

摘要

目的:建立一种恒温条件下简便快速的非结核分枝杆菌核酸检测方法.方法:设计包括海分枝杆菌、脓肿分枝杆菌和堪萨斯分枝杆菌3种非结核分枝杆菌的特异性引物,采用重组酶介导恒温扩增技术,建立高效快速的非结核分枝杆菌检测方法.结果:重组酶介导恒温扩增荧光反应在39°C下进行约20分钟即可得到检测结果.重组酶介导恒温扩增技术检测三种非结核分枝杆菌的检测下限可达103拷贝/u l,与结核分枝杆菌以及其他临床常见致病菌均无交叉反应,检测特异性为100％.对临床相应的非结核分枝杆菌均能很好的检测.结论:该方法为非结核分枝杆菌检测提供了一种可在简便环境中特异、灵敏的快速检测手段.