慢病毒转GGCX基因对兔骨性关节炎软骨细胞的生物学影响

摘要

目的：研究(γ-谷氨酰基羧化酶)GGCX基因转染后OA软骨细胞中Ⅱ型胶原及X型胶原在体外模型中的表达情况,探讨GGCX是否通过调节OA软骨细胞的生物状态对OA软骨提供保护. 方法：选取12只重量约(2.0±0.2)kg左右的日本雄性大耳兔,运用膝前交叉韧带切断的方法构建动物模型.对白兔进行6周饲养后处死,对兔膝关节的软骨细胞进行分离以及培养.随机将软骨细胞分为三个组：空白对照组(不作任何处理)、阴性对照组(转染不含GGCX慢病毒的空载体)、转染组(转染含GGCX慢病毒).转染成功后分别用qRT-PCR法及Western blot法检测各组中软骨细胞中GGCX、Ⅱ型胶原、X型胶原mRNA及蛋白表达水平. 结果：GGCX在转染组中表达水平明显升高,Ⅱ型胶原在转染组中表达明显升高,X型胶原在转染组中表达水平亦明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05),阴性对照组与空白对照组之间相比较无显著差异(P＞0.05). 结论：GGCX能够通过调节Ⅱ型胶原及X型胶原的表达从而调节OA的发生.