Wnt5a与白血病发生的关系及其机制研究

摘要

目的:探讨Wnt5a过表达在白血病细胞中的作用及其机制.为白血病分子靶向治疗和寻找新的肿瘤诊断标志物奠定理论基础.方法:采用Westem blot、免疫荧光染色、免疫细胞化学染色、免疫电镜检测、激光共聚焦三维重构、免疫共沉淀等方法,分析K562细胞Wnt5a过表达对Ror2、Frz4、LRP5受体Wnt信号核心分子β-catenin的表达水平及细胞定位的影响.并检测β-catenin磷酸化水平、β-catenin/TCF转录活性以及下游靶基因cyclinD1表达水平.用Ror2抗体阻断非经典WntSa-Ror2-Frz4通路,验证Wnt5a过表达是否通过Frz4/LRP5复合受体发挥作用,并检测β-catenin表达和磷酸化状态,以及cyclinD1表达水平.MTT法分析K562细胞增殖抑制,流式细胞术检测细胞周期变化.