新生儿血培养中凝固酶阴性葡萄球菌的分子生物学研究及临床意义

摘要

目的通过对凝固酶阴性葡萄球菌菌株进行分型及细胞间粘附基因(ica)A和ica D的检测，探讨分子生物学检测方法在新生儿凝固酶阴性葡萄球菌败血症中的诊断意义及与临床的相关性。方法将本院新生儿病房2001年11月至2003年3月血培养为凝固酶阴性葡萄球菌的患儿列入本研究。对入选的凝固酶阴性葡萄球菌菌株用脉冲电场凝胶电泳方法分析菌株;通过应用聚合酶链反应(PCR)方法检测icaA及icaD的存在。结果共有80例患儿入选，其中9例患儿分离出≥2株凝固酶阴性葡萄球菌菌株。血培养为凝固酶阴性葡萄球菌的临床分离菌株共有90株。在临床诊断的27例(33．8％)败血症中，早产儿7例，足月小样儿2例。在菌种的分布上，表皮葡萄球菌18例(66．7％)，溶血葡萄球菌7例(25．9％)，人葡萄球菌2例(7．4％)。脉冲电场凝胶电泳对90株入选菌株共分为46型，其中表皮葡萄球菌37型，溶血葡萄球菌lO型，人葡萄球菌2型，华纳葡萄球菌1型。在临床分离的90株凝固酶阴性葡萄球菌菌株中，共有6组图形完全一致，属于同一菌株。其中两组(4株CNS菌株)分别来自于2例患儿不同时期的血培养结果，故脉冲电场凝胶电泳可以协助临床明确诊断败血症。对90株凝固酶阴性葡萄球菌菌株应用PCR方法检测icaA及icaD，共有8株阳性，均为表皮葡萄球菌，并且icaA和icaD同时阳性。在经PCR扩增后所产生的图谱中，icaA在814bp，icaD在282bp。在ica阳性的8例病例中，临床诊断为败血症7例，一致率为87．5％，在临床排除败血症的53例患儿中，仅有1例ica阳性(1．8％)。ica的阳性预测值为25．9％，阴性预测值为98．1％。结论脉冲电场凝胶电泳是一种敏感性高的凝固酶阴性葡萄球菌菌株分型方法，它可以协助临床诊断败血症。ica基因PCR检测是临床诊断凝固酶阴性葡萄球菌败血症或导管相关感染的一种潜在的实验室方法。