鸡新城疫病毒感染性核酸免疫抗原、抗体和N基因的检测

摘要

SDS-蛋白酶K法提取鸡新城疫病毒(NDV)，lasota株鸡胚尿囊液毒纯化病毒的全基因组RNA，DEAE纤维素长距离柱层析纯化后，适量肌肉注射100日龄DNV非免疫鸡，24小时后口服过量的特异活性蛋白酶，于不同试验时间分别采取试验鸡血清和不同组织脏器，采用Dot-ELISA．Westernblot和Southemblot方法分别检测试验鸡NDV杭体、DNA杭原和NDVN基因。结果表明，NDV感染性核酸注射后24小时，口服活性蛋白酶，48小时后出现NDV特异性杭体，％小时杭体达最高峰，Dot-ELISA血清杭体效价可达1：1024：无活性蛋白酶情况下，感染性核酸注射后120小时开始出现DNA特异性杭体，Dot-ELISA血清效价仅为1：16；Westernblot和Southernblot分别可自多个组织脏器中检测到NDV杭原及N基因。