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毛细管电泳-激光诱导荧光高灵敏检测苯并(a)芘-DNA加合物

摘要

苯并(a)芘(Benzo(a)pyrene,B(a)P)是一种典型的多环芳烃类污染物。苯并(a)-此进入人体后,除少部分随粪便排出外,剩下的部分的在体内经过一系列的代谢活化形成邻二醇环氧苯并(a)-芘(BPDE)。BPDE会进攻DNA鸟嘌呤的2位氨基,并与之共价结合形成BPDE-Nz-dG加合物。DNA加合物若发生在某些关键基因(如原癌基因RAS和抑癌基因p53)时,就可能诱发癌症。本文中将高效快速的毛细管电泳与高灵敏的激光诱导荧光相结合,建立了一种DNA加合物的免疫分析方法。将建立的方法用于BPDE暴露的A549细胞中BPDE-dG加合物的含量测定,BPDE-dG加合物的生成量随BPDE暴露浓度的增加而升高。参照实验室以前报道的BPDE-DNA加合物标准品的制备方法制备标准品,并利用UPLC-MS的方法进行含量鉴定。CE-LIF测定BPDE-DNA加合物标准品,建立标准曲线以及线性关系:F=4.02+2.61C,R2=0.976。

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