人羊膜匀浆上清液对大鼠角朊细胞生长的影响

摘要

本文观察不同浓度人羊膜匀浆上清液(hAHS)对体外培养的SD大鼠角朊细胞生长的影响.取SD幼鼠背部皮肤,采用中性蛋白酶与胰蛋白酶复合消化的方法,分离原代角朊细胞.将新鲜人羊膜制备成hAHS,用考马斯亮蓝法、ELISA法分别测定hAHS中总蛋白含量和表皮生长因子(EGF)、碱性成纤维生长因子(bFGF)、血管内皮生长因子(VEGF)的浓度.用不同浓度hAHS对第一代角朊细胞进行体外培养:将细胞以2.5×104个·mL1密度接种于96孔板中,每孔加100μL,含10％FBS低糖培养基孵育24h后,根据hAHS在低糖DMEM培养基中的不同体积分数(0、10、15、20、25％)进行换液,于孵育后第0、24、48、96h用噻唑兰法检测各孔的吸光度(A)值并绘制角朊细胞的生长曲线和计算各组细胞增殖率.