基于线粒体凋亡途径探讨脾肾双补方对离体人早孕绒毛滋养细胞HTR-8的影响

摘要

目的:探索脾肾双补方对人早孕绒毛滋养细胞中凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及Bcl-2/Bax比值表达的影响. 方法:将50只SPF级健康成年雌性SD大鼠随机平均分成空白对照组,地屈孕酮组,脾肾双补方高、中、低剂量组5组.连续7天给以相应溶液灌胃,于第7天末次给药1h后行股动脉采血处理后制备含药血清,将含各种药物血清的完全培养基分别加入5瓶对应分组HTR-8细胞中进行培养,观察48h后HE染色的各组细胞总数、凋亡细胞数目及免疫组织化学法检测各组细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及Caspase-3表达的情况. 结果:与空白对照组相比,脾肾双补方高、中剂量组HTR-8细胞的细胞总数、抑凋亡蛋白Bcl-2的表达均升高(P＜0.05),凋亡蛋白Bax、Caspase-3表达及凋亡细胞数均降低;与地屈孕酮组相比,脾肾双补方高、中剂量组细胞总数、凋亡细胞数、Bcl-2、Bax及Caspase-3的差异均无统计学意义(P＞0.05). 结论:脾肾双补方含药血清可以促进人早孕绒毛滋养细胞数目增加,其机制可能是:减少人早孕绒毛滋养细胞的凋亡,保护细胞存活,继而有利于早期妊娠的维持,其作用途径可能是:脾肾双补方含药血清通过提高细胞凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达,降低细胞促凋亡蛋白Bax的表达,提高Bcl-2/Bax的比值,减少人早孕绒毛滋养细胞的凋亡,保护细胞存活,维持生长,促进妊娠早期胚胎的正常发育,进而维持早期妊娠的正常进行.