ZO-1基因甲基化状态检测在儿童非霍奇金淋巴瘤的分析

摘要

目的：探讨紧密连接蛋白(ZO-1)基因启动子区甲基化状态在儿童非霍奇金淋巴瘤(NHL)Ⅳ期检测中的临床意义,以进一步寻找病因及早期诊断方法. 方法：将55例确诊为NHLⅣ期(T细胞型40例,B细胞型15例)患儿的骨髓标本作为病例组,20例非血液肿瘤患儿骨髓标本作为对照组.采用甲基化特异性PCR法(MS-PCR)检测病例组与对照组骨髓中ZO-1基因启动子区甲基化状态,并检测光密度积分值(IOD).逆转录PCR法(RT-PCR)检测病例组与对照组ZO-1基因mRNA的表达情况. 结果：MS-PCR检测结果显示病例组治疗前39例出现ZO-1基因甲基化条带,阳性率为70.9％(39/55),对照组20例均呈非甲基化状态;治疗过程中,行动态观察NHL患儿47例,其中T细胞型32例,B细胞型15例,治疗前ZO-1基因甲基化阳性率分别为72％和67％,两者差异无统计学意义(P=0.572).T细胞型与B细胞型NHL患儿治疗前与化疗早期、中期比较差异均无统计学意义(P＞0.05),而与化疗后期比较差异均有统计学意义(P＜0.05).RT-PCR检测结果显示病例组中ZO-1甲基化阳性病例均无mRNA表达,对照组患儿均表达ZO-1mRNA.外周血白细胞总数与ZO-1基因IOD值无直线相关关系(r=0.093,P=0.575);骨髓中恶性肿瘤细胞数与ZO-1基因IOD值呈正相关关系(r=0.669,P＜0.001). 结论：ZO-1基因在儿童NHL中呈特异性高甲基化状态,其程度与骨髓中恶性肿瘤细胞数呈正相关.ZO-1基因可能成为新的分子标志,为临床早期诊断、疗效判断、预后评价、微小残留检测提供新的指标.