“香槟”月季的组织培养和试管开花诱导研究

摘要

"香槟"月季为蔷薇科蔷薇属植物,在广州一年四季均可开花,花色大红,重瓣,有香味,是很好的盆栽、园林绿化月季品种.近年来,受韩国、英国等海外"迷你花卉"市场的影响,我国的"迷你花卉"市场也迅速发展起来.月季花是我国十大名花之一,有花中皇后之美誉,海外一般称月季为玫瑰,最早的"迷你花卉"即是在试管中开花的"手指玫瑰",将其制作成各种精美的挂件等装饰品,是馈赠亲朋好友的一种新型礼物.由于植物在试管中开花在技术上有一定难度,使得市场上开花的"迷你花卉"商品很少,制约了"迷你花卉"市场的发展.本文在研究了"香槟"月季组织培养技术的基础上,研究了诱导"香槟"月季试管开花的培养基组成和培养条件,该技术的研究,为"手指玫瑰"增添了新品种,为其他品种月季试管花诱导提供借鉴,为探索月季花芽分化、开花的分子生物学机制提供理想的实验系统.本研究是利用"香槟"月季的当年生茎段外植体进行接种,获得无菌"香槟"月季试管苗,在研究了"香槟"月季外植体灭菌技术、继代增殖技术、生根技术的基础上,研究了"香槟"月季的试管苗诱导开花技术.研究显示:(1)茎段外植体用0.1％升汞消毒15 min后,接种于培养基MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.1 mg/L中,有60％的茎段萌生1～3cm长的叶腋芽,可以剪切进行继代培养.(2)叶腋芽接入MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L中,培养40d增殖系数达2.7,新芽平均高度1.2 cm,不定芽较粗壮.当IBA浓度不变,6-BA浓度增加至2.0mg/L和3.0mg/L时,增殖系数为2.3和2.7,但新芽高度只有1.0 cm和0.7 cm,因此适宜的增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L.(3)当不定芽增殖到一定数量,将高度达2.0 cm以上的不定芽接入生根培养基1/2MS+NAA 0.3 mg/L中,生根率达80％,平均根长0.7cm,平均根数4.1条,NAA浓度为0.1 mg/L或0.5 mg/L时生根率分别为67％和69％,平均根长分别为1.2 cm和0.7 cm,平均根数4.0条和4.8条.以上培养基附加活性炭1g/L和2g后,生根率会有所下降,未能促进生根.综合比较,适宜的生根培养基为1/2MS+NAA 0.3 mg/L.(4)诱导"香槟"月季试管开花的适宜培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.i mg/L,用150 ml的三角瓶培养,在培养温度21°C、光照强度4000～6000lx,光照16 h/d的条件下,花芽诱导率为17％,正常开花率为57％.以上培养基均附加卡拉胶9g/L,pH 5.8,诱导和增殖培养基附加蔗糖30g/L,生根培养基附加蔗糖20 g/L.离体快繁培养条件为温度25±1°C,光照强度20001x,光照时间12h/d.