中性粒细胞核酸网在大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用

摘要

目的：探讨NETs是否存在于缺血再灌注心肌以及清除NETs是否能够改善缺血再灌注引起的心脏无复流、挽救缺血心肌并且最终改善心肌缺血引起的心室重塑。方法:根据干预方式的不同将6周龄雄性Wistar大鼠随机分至I/RControl组、DNase组、rt-PADNase+rt-PA组、Sham Control组。各组大鼠开胸结扎冠状动脉左前降支45分钟，再灌注3小时。于再灌注开始前5分钟静脉注射干预药物。通过组蛋白2B,髓过氧化物酶以及脱氧核糖核酸的三色免疫荧光激光共聚焦显微成像检测心肌组织的NETs。通过氯化三苯基四氮唑、硫磺素S、伊文斯蓝染色评估干预药物对于大鼠心肌梗死及无复流面积的影响。长期实验在保留原手术组的基础上，将假手术组分为Sham Control组、Sham DNase组、Sham rt-PA组、Sham DNase+rt-PA组。结果:在缺血45分钟再灌注3小时的大鼠心肌内存在组蛋白2B , MPO以及DNA的共表达，提示NETs存在于缺血心肌组织中。各手术组缺血范围一致，与I/R Control组相比，DNase+ rt-PA组大鼠心梗面积比例明显降低，同时该组无复流面积比例明显降低。超声检查显示，与I/R Control组相比，DNase+rt-PA组大鼠心脏射血分数和短轴缩短率明显升高，收缩期和舒张期左室内径明显降低，左室收缩末期和舒张末期容积明显降低。血流动力学统计显示，DNase+rt-PA组大鼠左心室压力最大上升速度和下降速度较I/R Control组明显升高，左室舒张末期压明显降低。结论：本研究首次证实在大鼠缺血再灌注心肌内存在NETs，联合DNase和rt-PA可降低缺血再灌注后心肌梗死面积，提高心肌灌注水平，改善缺血后心室重塑。