小鼠巨细胞病毒重复感染促进疾病的进展

摘要

目的:在整体水平观察小鼠巨细胞病毒(MCMV)重复感染(reinfection)对MCMV全身播散性感染小鼠模型各器官病理损害程度及病毒滴度的影响,初步探讨其促进疾病进展的免疫学机制.方法:①MCMV重复感染动物模型的建立及标本收集:将96只4周龄8-10g幼年雌性BALB/c小鼠随机分成4组:正常对照组、单次感染组、两次感染同株病毒组及两次感染不同株病毒组.给小鼠腹腔注射DMEM/H或者MCMVSmith病毒悬液,于第1次注射后第5天再次腹腔注射DMEM/H、MCMVSmith或者MCMV RM461病毒悬液,分别在第2次注射后的3d、7d、14d、28d无菌取唾液腺、肺脏、心脏、肝脏、肾脏、脾脏组织标本进行检测.②各脏器病理损害程度及感染性病毒滴度评估:对石蜡包埋切片的各组织脏器采用常规HE染色后根据相应的评分标准进行病理评估;标准蚀斑法检测各组织脏器中的病毒滴度.③流式细胞术检测各时间点模型鼠脾脏组织中Th1(CD4+IFN-γ+)和Th2(CD4+IL-4+)细胞比率变化.结果：①感染后3d各组织脏器己出现明显炎症改变，除肾脏在感染后14d炎症反应最重外，余脏器组织在感染7d时最重，之后病理损害缓慢减轻，脾脏和唾液腺是其中恢复较迅速的组织。②感染后3d,MCWV主要播散脏器中检出感染性病毒，同期各组织脏器中病毒滴度以唾液腺最高，其次为肺脏组织，感染后7d，唾液腺和肺组织中病毒滴度达到峰值，随后逐渐下降，28d检测不出。结论:通过给BALB/c序贯注射Smith和RM461毒株可以成功建立小鼠的重复感染模型;MCMV的重复感染能增加急性期宿主组织脏器中感染性病毒含量，并加重脏器病理损伤程度。在急性感染早期，不同MCMV毒株的重复感染较同一毒株的重复感染可导致更高的组织病毒载量;MCMV的重复感染对宿主的不利影响可能跟早期Th1(CD4+IFN-γ+)的水平明显增高导致炎性损伤和后期Th2(CD4+IL-4+)水平增高导致免疫抑制密切相关。