腺病毒介导的心肌营养素-1对大鼠骨髓间充质干细胞向神经方向分化的作用

摘要

目的：观察腺病毒介导的心肌营养素-1(Adv-EGFP-CT-1)对大鼠骨髓间充质干细胞(rBMSCs)向神经方向分化的作用.方法：全骨髓贴壁筛选法分离培养rBMSCs,纯化至第三代(P3),流式细胞术鉴定细胞表面标记性蛋白.将细胞分为以下4组:对照组、Adv-EGFP(重组腺病毒增强型绿色荧光蛋白)转染组、Adv-EGFP-CT-1转染组及诱导剂组,各转染组分别向培养液中加入对应的腺病毒液,转染复数MOI=200.转然后48h,除对照组外,其他各组均予神经分化诱导,于诱导后5h、3d、7d观察各组细胞形态学变化、细胞免疫荧光检测各组Nestin、NeuN、GFAP的表达.结果：诱导处理后,除对照组外,其他各组均显示类神经细胞样形态改变,其中CT-1组此变化最明显.诱导后5h Nestin的阳性率最高,其中CT-1组的阳性率均高于其他各组(86.31％±4.27％),差异有统计学意义(P＜0.05),随后其阳性率逐渐下降,CT1组较其他各组变化明显,差异有统计学意义(P＜0.05);诱导后5h CT-1组NeuN、GFAP即有少量表达,随后NeuN、GFAP阳性率逐渐升高,至第7d时阳性率最高,其中,CT-1组各时间点NeuN、GFAP阳性率均高于其他各组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论：CT-1可以促进rBMSCs向神经方向分化.